內容介紹
劉娣等*的《豬功能基因研究》以豬繁殖、脂肪 、肉質、肌肉生長、抗逆等重要經濟性狀候選基因的 遺傳分析為主要內容,包括對相關基因及序列進行的 剋隆、錶達、多樣性分析、功能分析以及結構分析等 。希望能為豬的分子育種,如標記輔助選擇、基因組 選擇、多基因聚閤和轉基因研究*goxg參考。
目錄
序qiax言1 豬重要經濟性狀候選基因研究進展 1.1 繁殖性狀候選基因研究進展 1.1.1 雌激素受體基因 1.1.2 卵泡刺激素基因 1.1.3 促黃體素基因 1.1.4 骨形態發生蛋白基因 1.1.5 促性腺激素釋放激素及其受體基因 1.1.6 促紅細胞生成素受體 1.1.7 骨橋蛋白基因 1.1.8 榖胱甘肽硫轉移酶M2亞型基因 1.1.9 TGF-β1基因 1.1.10 催乳素受體基因 1.1.11 視黃醇結閤蛋白4基因 1.1.12 視黃酸受體基因 1.1.13視黃素X受體基因 1.1.14 甲狀腺素運載蛋白基因 1.2 脂肪性狀候選基因研究進展 1.2.1 肝細胞核因子-4α基因 1.2.2 肝X受體基因 1.2.3 Krox20基因 1.2.4 脂蛋白脂肪酶基因 1.2.5 脂肪酸結閤蛋白基因 1.2.6 肥胖基因 1.2.7 激素敏感脂肪酶基因 1.3 肉質性狀候選基因研究進展 1.3.1 腺苷1磷酸脫氨酶基因 1.3.2 腺苷琥珀酸裂解酶基因 1.3.3 氨基咪唑氨甲酰核苷酸轉甲酰基酶/次黃嘌呤核苷酸環水解酶基因 1.3.4 榖氨酰胺磷酸核糖焦磷酸酰胺轉移酶基因 1.3.5 鈣蛋白酶基因 1.3.6 半胱氨酸蛋白酶抑製劑B基因 1.4 肌肉生長性狀候選基因研究進展 1.4.1 生肌調節因子傢族 1.4.2 肌細胞增強因子2傢族 1.4.3 肌肉生長抑製素基因 1.4.4 I型蘭尼定受體基因 1.5 抗逆性狀候選基因研究進展 1.5.1 抗黏液病du基因 1.5.2 天然抗性巨噬蛋白l基因 1.5.3 唾液酸閤成酶基因 1.5.4 Toll樣受體傢族 1.5.5 冷誘導R*A結閤蛋白基因 1.5.6 Y-box結閤蛋白-1基因 1.6 體長性狀候選基因研究進展 1.6.1 多形性腺瘤基因 1.6.2 生殖細胞核因子 1.6.3 配體依賴的核受體輔阻遏物2 豬基因剋隆與序列分析 2.1 材料與方* 2.1.1 實驗動物組織樣 2.1.2 菌株和剋隆載體 2.1.3 主要儀器設備 2.1.4 主要藥品和酶 2.1.5 緩衝液及主要溶液的配製 2.1.6 D*A的*取與檢測 2.1.7 組織zoxgR*A的*取與檢測 2.1.8 引物設計與閤成 2.1.9 cD*A剋隆 2.1.10 基因組D*A剋隆 2.1.11 主要分子生物學軟件及統計分析軟件 2.2 結果與分析 2.2.1 H*F-4α基因剋隆與序列分析 2.2.2 LXRα基因剋隆與序列分析 2.2.3 RXRα基因剋隆與序列分析 2.2.4 MEF2A基因剋隆及序列分析 2.2.5 CstB基因剋隆與序列分析 2.2.6 RPS3基因剋隆與序列分析 2.2.7 OP*基因剋隆與序列分析 2.2.8 EPOR基因剋隆與序列分析 2.2.9 GxRt丁及其受體基因剋隆與序列分析 2.2.10 長白豬ADSL基因剋隆與序列分析 2.2.11 長白豬PurH基因剋隆與序列分析 2.2.12 民豬GPAT基因剋隆與序列分析 2.2.13 民豬MyoG基因剋隆與序列分析 2.2.14 SRPK1/3基因剋隆與序列分析 2.2.15 BMP-6基因剋隆與序列分析 2.2.16 IGFBP7基因剋隆與序列分析 2.2.17 CIRP基因剋隆與序列分析 2.2.18 PDZR*3基因剋隆與序列分析 2.2.19 COX1基因剋隆與序列分析 2.2.20 *A*S基因剋隆與序列分析 2.2.21 *LJMB基因剋隆與序列分析 2.2.22 IgG重鏈基因剋隆與序列分析 2.2.23 IRG6基因剋隆與序列分析 2.2.24 OAS1基因剋隆與序列分析 2.2.25 YB1基因剋隆與序列分析 2.3 討論 2.3.1 關於取樣、R*A*取和反轉錄反應 2.3.2 cD*A剋隆 2.3.3 基因組D*A部分片段剋隆3 豬基因錶達規律研究 3.1 材料與方* 3.1.1 實驗動物組織樣 3.1.2 主要儀器設備 3.1.3 zoxgR*A的*取與檢測 3.1.4 引物設計與閤成 3.1.5 反轉錄反應 3.1.6 綫性增長試驗 3.1.7 PCR擴增 3.1.8 瓊脂糖凝膠電泳檢測 3.1.9 競爭性RT-PCR 3.1.10 Real-time PCR反應 3.1.11 數據分析 3.2 結果與分析 3.2.1 RBP4基因的時空轉錄情況 3.2.2 RAR基因的時空轉錄情況 3.2.3 RXR基因的時空轉錄情況 3.2.4 TTR基因的時空轉錄情況 3.2.5 H*F-4α基因的轉錄情況 3.2.6 LXRa基因的時空轉錄情況 3.2.7 OP*基因的時空轉錄情況 3.2.8 MEf2基因的轉錄分析 3.2.9 EGR2及其調控相關基因的轉錄情況檢測 3.2.10 MC3及基因的轉錄分析 3.2.11 CstB基因的時空轉錄分析 3.2.12 LPL基因的時空轉錄分析 3.2.13 SRPK1/3基因的時空轉錄分析 3.2.14 BMP-6基因的定量檢測 3.2.15 IGFBP7基因的定量檢測 3.3 討論 3.3.1 相對定量RT-PCR分析 3.3.2 競爭勝RT-PCR分析 3.3.3 Real-time PCR分析4 豬基因單核苷酸多態性分析 4.1 實驗方* 4.1.1 實驗動物組織樣 4.1.2 藥品和酶 4.1.3 主要儀器設備 4.1.4 基因組D*A的*取與檢測 4.1.5 引物設計與閤成 4.1.6 PCR_SSCP檢測 4.1.7 基因多態性的統計方* 4.2 結果與分析 4.2.1 EGR2基因的單核苷酸多態性分析 4.2.2 H*F-4α基因的單核苷酸多態性分析 4.2.3 ADSL基因的單核苷酸多態性分析 4.2.4 PurH基因的單核苷酸多態性分析 4.2.5 GPAT基因的單核苷酸多態性分析 4.2.6 SRPK1/3基因的單核苷酸多態性分析 4.2.7 GSTM2基因的單核苷酸多態性分析 4.2.8 TGF-β1基因的單核苷酸多態性分析 4.2.9 BMP-6基因的單核苷酸多態性分析 4.2.10 GxRHR基因的單核苷酸多態性分析 4.2.11 TLR4基因的多態性分析 4.2.12 PLAG1基因多態性分析 4.2.13 *R6A1基因多態性分析 4.2.14 LCORL基因多態性分析 4.3 討論 4.3.1 基因組D*A*取 4.3.2 PCR-SSCP多態性分析5 豬基因功能分析 5.1 實驗方* 5.1.1 緩衝液及主要試劑的配製 5.1.2 引物的設計與閤成 5.1.3 細胞培養 5.1.4 R*A乾擾 5.1.5 過量錶達 5.1.6 熒光素酶活性測定 5.1.7 數據統計分析 5.1.8 生物信息學分析 5.2 結果與分析 5.2.1 Krox20對脂肪細胞的影響 5.2.2 Smad3、GDF8和MyoD對豬骨骼肌衛星細胞的影響及互作 5.2.3 民豬MyoG基因啓動子核心區定位 5.2.4 民豬CYP1A1基因啓動子核心區定位 5.2.5 民豬MC4R基因啓動子核心區定位 5.2.6 民豬FST基因啓動子核心區定位 5.3 討論 5.3.1 shR*A的設計與篩選 5.3.2 qiax體脂肪細胞體外培養 5.3.3 骨骼肌衛星細胞培養及鑒定 5.3.4 轉染效率的影響因素 5.3.5 Krox20對豬qiax體脂肪細胞增殖和分化的影響_ 5.3.6 Smad3、MyoD與GDF-8對豬骨骼肌衛星細胞增殖的影響 5.3.7 Smad3、MyoD與GDF-8在骨骼肌衛星細胞增殖過程中的調控網絡關係 5.3.8 MyoG基因啓動子區域生物信息學分析 5.3.9 MyoG基因啓動子活性分析 5.3.10 CYP1A1基因啓動子活性分析 5.3.11 MC4R基因啓動子活性分析6 豬基因組織特異性錶達分析 6.1 材料與方* 6.1.1 載體與菌株 6.1.2 MC4R特異錶達載體的構建與錶達 6.1.3 FST基因特異錶達載體的構建與錶達 6.2 結果與分析 6.2.1 MC4R基因特異錶達載體的構建與錶達 6.2.2 FST基因特異錶達載體的構建與錶達 6.3 討論 6.3.1 MC4R-P1/P2重組質粒的構建 6.3.2 FST-P1、FST-P2重組質粒的構建 6.3.3 FST-P3、FST-P4重組質粒的構建 6.3.4 Tet-Ox係統的優點 6.3.5 瞬時轉染後細胞狀態的觀察 6.3.6 誘導錶達基因的檢測 6.3.7 誘導MC4R基因對CMS係統的影響 6.3.8 FST與MyoD、MyoG、MST*、GDF11之間的互作分析7 高通量測序分析豬差異錶達基因 7.1 材料與方* 7.1.1 實驗材料與測序 7.1.2 數據整理與分析 7.2 結果與分析 7.2.1 測序質量評估 7.2.2 cleax tag拷貝數分布統計 7.2.3 clearx tag比對統計 7.2.4 差異錶達基因及部分功能基因的錶達 7.2.5 反義轉錄本與新轉錄本預測結果 7.2.6 GO功能顯著性富集分析 7.2.7 Pathway顯著性富集分析 7.2.8 測序飽和度分析 7.3 討論 7.3.1 高通量測序數據的初步分析 7.3.2 部分差顯基因或轉錄子的錶達分析 7.3.3 GO和Pathway分析參考文獻附錄 附錄1 本研究中獲得的GexBaxk登錄號 附錄二 本研究涉及的學位論文 附錄三 差異倍數在2倍以上的上調差異基因 附錄四 差異倍數在2倍以上的下調差異基因 附錄五 彩色插圖 附錄六 本研究涉及的豬種 附錄七 參編人員
序 qiax言 1 豬重要經濟性狀候選基因研究進展 1.1 繁殖性狀候選基因研究進展 1.1.1 雌激素受體基因 1.1.2 卵泡刺激素基因 1.1.3 促黃體素基因 1.1.4 骨形態發生蛋白基因 1.1.5 促性腺激素釋放激素及其受體基因 1.1.6 促紅細胞生成素受體 1.1.7 骨橋蛋白基因 1.1.8 榖胱甘肽硫轉移酶M2亞型基因 1.1.9 TGF-β1基因 1.1.10 催乳素受體基因 1.1.11 視黃醇結閤蛋白4基因 1.1.12 視黃酸受體基因 1.1.13視黃素X受體基因 1.1.14 甲狀腺素運載蛋白基因 1.2 脂肪性狀候選基因研究進展 1.2.1 肝細胞核因子-4α基因 1.2.2 肝X受體基因 1.2.3 Krox20基因 1.2.4 脂蛋白脂肪酶基因 1.2.5 脂肪酸結閤蛋白基因 1.2.6 肥胖基因 1.2.7 激素敏感脂肪酶基因 1.3 肉質性狀候選基因研究進展 1.3.1 腺苷1磷酸脫氨酶基因 1.3.2 腺苷琥珀酸裂解酶基因 1.3.3 氨基咪唑氨甲酰核苷酸轉甲酰基酶/次黃嘌呤核苷酸環水解酶基因 1.3.4 榖氨酰胺磷酸核糖焦磷酸酰胺轉移酶基因 1.3.5 鈣蛋白酶基因 1.3.6 半胱氨酸蛋白酶抑製劑B基因 1.4 肌肉生長性狀候選基因研究進展 1.4.1 生肌調節因子傢族 1.4.2 肌細胞增強因子2傢族 1.4.3 肌肉生長抑製素基因 1.4.4 I型蘭尼定受體基因 1.5 抗逆性狀候選基因研究進展 1.5.1 抗黏液病du基因 1.5.2 天然抗性巨噬蛋白l基因 1.5.3 唾液酸閤成酶基因 1.5.4 Toll樣受體傢族 1.5.5 冷誘導R*A結閤蛋白基因 1.5.6 Y-box結閤蛋白-1基因 1.6 體長性狀候選基因研究進展 1.6.1 多形性腺瘤基因 1.6.2 生殖細胞核因子 1.6.3 配體依賴的核受體輔阻遏物 2 豬基因剋隆與序列分析 2.1 材料與方* 2.1.1 實驗動物組織樣 2.1.2 菌株和剋隆載體 2.1.3 主要儀器設備 2.1.4 主要藥品和酶 2.1.5 緩衝液及主要溶液的配製 2.1.6 D*A的*取與檢測 2.1.7 組織zoxgR*A的*取與檢測 2.1.8 引物設計與閤成 2.1.9 cD*A剋隆 2.1.10 基因組D*A剋隆 2.1.11 主要分子生物學軟件及統計分析軟件 2.2 結果與分析 2.2.1 H*F-4α基因剋隆與序列分析 2.2.2 LXRα基因剋隆與序列分析 2.2.3 RXRα基因剋隆與序列分析 2.2.4 MEF2A基因剋隆及序列分析 2.2.5 CstB基因剋隆與序列分析 2.2.6 RPS3基因剋隆與序列分析 2.2.7 OP*基因剋隆與序列分析 2.2.8 EPOR基因剋隆與序列分析 2.2.9 GxRt丁及其受體基因剋隆與序列分析 2.2.10 長白豬ADSL基因剋隆與序列分析 2.2.11 長白豬PurH基因剋隆與序列分析 2.2.12 民豬GPAT基因剋隆與序列分析 2.2.13 民豬MyoG基因剋隆與序列分析 2.2.14 SRPK1/3基因剋隆與序列分析 2.2.15 BMP-6基因剋隆與序列分析 2.2.16 IGFBP7基因剋隆與序列分析 2.2.17 CIRP基因剋隆與序列分析 2.2.18 PDZR*3基因剋隆與序列分析 2.2.19 COX1基因剋隆與序列分析 2.2.20 *A*S基因剋隆與序列分析 2.2.21 *LJMB基因剋隆與序列分析 2.2.22 IgG重鏈基因剋隆與序列分析 2.2.23 IRG6基因剋隆與序列分析 2.2.24 OAS1基因剋隆與序列分析 2.2.25 YB1基因剋隆與序列分析 2.3 討論 2.3.1 關於取樣、R*A*取和反轉錄反應 2.3.2 cD*A剋隆 2.3.3 基因組D*A部分片段剋隆 3 豬基因錶達規律研究 3.1 材料與方* 3.1.1 實驗動物組織樣 3.1.2 主要儀器設備 3.1.3 zoxgR*A的*取與檢測 3.1.4 引物設計與閤成 3.1.5 反轉錄反應 3.1.6 綫性增長試驗 3.1.7 PCR擴增 3.1.8 瓊脂糖凝膠電泳檢測 3.1.9 競爭性RT-PCR 3.1.10 Real-time PCR反應 3.1.11 數據分析 3.2 結果與分析 3.2.1 RBP4基因的時空轉錄情況 3.2.2 RAR基因的時空轉錄情況 3.2.3 RXR基因的時空轉錄情況 3.2.4 TTR基因的時空轉錄情況 3.2.5 H*F-4α基因的轉錄情況 3.2.6 LXRa基因的時空轉錄情況 3.2.7 OP*基因的時空轉錄情況 3.2.8 MEf2基因的轉錄分析 3.2.9 EGR2及其調控相關基因的轉錄情況檢測 3.2.10 MC3及基因的轉錄分析 3.2.11 CstB基因的時空轉錄分析 3.2.12 LPL基因的時空轉錄分析 3.2.13 SRPK1/3基因的時空轉錄分析 3.2.14 BMP-6基因的定量檢測 3.2.15 IGFBP7基因的定量檢測 3.3 討論 3.3.1 相對定量RT-PCR分析 3.3.2 競爭勝RT-PCR分析 3.3.3 Real-time PCR分析 4 豬基因單核苷酸多態性分析 4.1 實驗方* 4.1.1 實驗動物組織樣 4.1.2 藥品和酶 4.1.3 主要儀器設備 4.1.4 基因組D*A的*取與檢測 4.1.5 引物設計與閤成 4.1.6 PCR_SSCP檢測 4.1.7 基因多態性的統計方* 4.2 結果與分析 4.2.1 EGR2基因的單核苷酸多態性分析 4.2.2 H*F-4α基因的單核苷酸多態性分析 4.2.3 ADSL基因的單核苷酸多態性分析 4.2.4 PurH基因的單核苷酸多態性分析 4.2.5 GPAT基因的單核苷酸多態性分析 4.2.6 SRPK1/3基因的單核苷酸多態性分析 4.2.7 GSTM2基因的單核苷酸多態性分析 4.2.8 TGF-β1基因的單核苷酸多態性分析 4.2.9 BMP-6基因的單核苷酸多態性分析 4.2.10 GxRHR基因的單核苷酸多態性分析 4.2.11 TLR4基因的多態性分析 4.2.12 PLAG1基因多態性分析 4.2.13 *R6A1基因多態性分析 4.2.14 LCORL基因多態性分析 4.3 討論 4.3.1 基因組D*A*取 4.3.2 PCR-SSCP多態性分析 5 豬基因功能分析 5.1 實驗方* 5.1.1 緩衝液及主要試劑的配製 5.1.2 引物的設計與閤成 5.1.3 細胞培養 5.1.4 R*A乾擾 5.1.5 過量錶達 5.1.6 熒光素酶活性測定 5.1.7 數據統計分析 5.1.8 生物信息學分析 5.2 結果與分析 5.2.1 Krox20對脂肪細胞的影響 5.2.2 Smad3、GDF8和MyoD對豬骨骼肌衛星細胞的影響及互作 5.2.3 民豬MyoG基因啓動子核心區定位 5.2.4 民豬CYP1A1基因啓動子核心區定位 5.2.5 民豬MC4R基因啓動子核心區定位 5.2.6 民豬FST基因啓動子核心區定位 5.3 討論 5.3.1 shR*A的設計與篩選 5.3.2 qiax體脂肪細胞體外培養 5.3.3 骨骼肌衛星細胞培養及鑒定 5.3.4 轉染效率的影響因素 5.3.5 Krox20對豬qiax體脂肪細胞增殖和分化的影響_ 5.3.6 Smad3、MyoD與GDF-8對豬骨骼肌衛星細胞增殖的影響 5.3.7 Smad3、MyoD與GDF-8在骨骼肌衛星細胞增殖過程中的調控網絡關係 5.3.8 MyoG基因啓動子區域生物信息學分析 5.3.9 MyoG基因啓動子活性分析 5.3.10 CYP1A1基因啓動子活性分析 5.3.11 MC4R基因啓動子活性分析 6 豬基因組織特異性錶達分析 6.1 材料與方* 6.1.1 載體與菌株 6.1.2 MC4R特異錶達載體的構建與錶達 6.1.3 FST基因特異錶達載體的構建與錶達 6.2 結果與分析 6.2.1 MC4R基因特異錶達載體的構建與錶達 6.2.2 FST基因特異錶達載體的構建與錶達 6.3 討論 6.3.1 MC4R-P1/P2重組質粒的構建 6.3.2 FST-P1、FST-P2重組質粒的構建 6.3.3 FST-P3、FST-P4重組質粒的構建 6.3.4 Tet-Ox係統的優點 6.3.5 瞬時轉染後細胞狀態的觀察 6.3.6 誘導錶達基因的檢測 6.3.7 誘導MC4R基因對CMS係統的影響 6.3.8 FST與MyoD、MyoG、MST*、GDF11之間的互作分析 7 高通量測序分析豬差異錶達基因 7.1 材料與方* 7.1.1 實驗材料與測序 7.1.2 數據整理與分析 7.2 結果與分析 7.2.1 測序質量評估 7.2.2 cleax tag拷貝數分布統計 7.2.3 clearx tag比對統計 7.2.4 差異錶達基因及部分功能基因的錶達 7.2.5 反義轉錄本與新轉錄本預測結果 7.2.6 GO功能顯著性富集分析 7.2.7 Pathway顯著性富
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