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內容簡介

　　《細胞生物學實驗教程（第二版）》被評為“十二五”普通高等教育本科國傢級規劃教材，是王金發教授主持編寫的《細胞生物學》配套實驗教材，是在2004年齣版的《細胞生物學實驗教程》基礎上重新修訂的。《細胞生物學實驗教程（第二版）》包括12章共71個實驗，內容既保留瞭目前在細胞生物學研究領域中經常用到的經典實驗，又新增瞭不少與現代細胞生物學和分子生物學相關的新技術，包括：綫粒體膜電位檢測，抗性膜和膽固醇去除，細胞電泳技術，DNA、RNA和蛋白質的原位雜交，差異基因錶達，酵母中cDNA的錶達，細胞凋亡檢測，果蠅胚胎的共聚焦顯微技術等。《細胞生物學實驗教程（第二版）》可供綜閤性大學及農林、醫學、師範院校本科生和研究生細胞生物學實驗課教學使用，也可作為從事相關專業研究人員的參考用書。

目錄

第二版前言
第一版前言
第一章 光學顯微鏡技術
實驗1 普通光學顯微鏡的構造原理及使用方法
實驗2 特殊顯微鏡的原理和使用
實驗3 光學顯微標本的製作技術

第二章 電子顯微鏡技術
實驗4 透射電子顯微鏡
實驗5 透射電子顯微鏡樣品製備
實驗6 掃描電子顯微鏡
實驗7 掃描電子顯微鏡樣品製備

第三章 細胞的形態結構
實驗8 細胞形態結構與幾種細胞器的觀察
實驗9 液泡係和綫粒體的活體染色
實驗10 用熒光脂質進行細胞活體染色
實驗11 植物細胞骨架的光學顯微鏡觀察
實驗12 細胞骨架的免疫熒光顯示
實驗13 細胞的超微結構
實驗14 細胞的顯微測量

第四章 細胞化學
實驗15 DNA的細胞化學——Feulgen反應
實驗16 RNA的細胞化學——Brachet反應
實驗17 細胞中多糖和過氧化物酶的定位
實驗18 細胞中酸性磷酸酶的定位
實驗19 細胞中堿性磷酸酶的定位

第五章 細胞生理
實驗20 小鼠巨噬細胞吞噬的觀察
實驗21 胞飲作用
實驗22 細胞膜的通透性
實驗23 核質穿梭測定法
實驗24 綫粒體膜電位檢測
實驗25 細胞電泳

第六章 細胞分裂與染色體畸變
實驗26 細胞的無絲分裂與有絲分裂
實驗27 細胞減數分裂
實驗28 環境因素及輻射誘變染色體改組的觀察
實驗29 細胞毒和細胞生長測定
實驗30 彗星測定

第七章 染色體技術與核型分析
實驗31 植物染色體標本的製備和觀察
實驗32 動物骨髓細胞染色體標本的製備
實驗33 人體外周血淋巴細胞培養與染色體標本製備
實驗34 人類染色體G帶技術
實驗35 植物染色體分帶技術
實驗36 人類體細胞染色體組型分析
實驗37 染色體核仁組織區（NOR）的顯示
實驗38 姐妹染色單體色差分析技術

第八章 細胞和組織培養技術
實驗39 植物組織培養技術
實驗40 原生質體的分離和培養
實驗41 細胞計數
實驗42 動物細胞原代培養
實驗43 果蠅胚胎細胞的原代培養
實驗44 傳代細胞培養
實驗45 細胞的凍存與復蘇

第九章 細胞化學成分的分離
實驗46 細胞核與綫粒體的分級分離
實驗47 高爾基體的分離
實驗48 核仁的分離
實驗49 過氧化物體的分離
實驗50 完整葉綠體的分離
實驗51 中期染色體的分離純化
實驗52 動物細胞基因組DNA的提取
實驗53 植物基因組DNA的提取
實驗54 細胞和組織總RNA的提取

第十章 蛋白質、核酸的定位與檢測
實驗55 瓊脂糖凝膠電泳檢測DNA片段
實驗56 同步檢測DNA、RNA和蛋白質的原位雜交技術
實驗57 銀染法檢測凝膠中的蛋白質——改良硝酸銀染法
實驗58 染色質免疫共沉澱
實驗59 代錶性差異分析：研究差異基因錶達的方法
實驗60 酵母中cDNA錶達

第十一章 細胞工程技術
實驗61 細胞融閤
實驗62 植物體細胞雜交——原生質體的融閤
實驗63 單剋隆抗體的製備
實驗64 産細胞剋隆測定
實驗65 去汙劑抗性膜和膽固醇去除的應用

第十二章 其他技術
實驗66 細胞放射自顯影
實驗67 流式細胞技術
實驗68 熒光標記技術
實驗69 細胞凋亡的檢測
實驗70 共聚焦顯微技術及去鏇技術
實驗71 果蠅胚胎的共聚焦顯微技術

參考文獻
附錄
附錄1 一些常用的換算
附錄2 常用試劑及溶液的配製和使用
附錄3 光學儀器保養與清潔的要點
附錄4 常用縮寫匯編
附錄5 常用細菌培養基的配方

精彩書摘

　　《細胞生物學實驗教程（第二版）》：
　　（三）顯微鏡的使用方法
　　1.用前的準備工作
　　（1）打開鏡箱，右手握住鏡臂，左手托住鏡座，小心地把顯微鏡從鏡箱內取齣，輕輕地放在實驗桌上。
　　（2）檢查顯微鏡的各部件是否完整和正常，如發現有部件損壞或齣現故障，應立即停止使用，待排除故障或修復後，纔能繼續操作。
　　2.低倍鏡的使用
　　（1）準備：將顯微鏡放於前方略偏左側，必要時使鏡筒傾斜（有的顯微鏡本身已經傾斜）以便觀察。轉動粗調節鈕，將鏡筒略升高（或將載物颱下降）使物鏡與載物颱距離拉開，以免物鏡與載物颱相碰。然後鏇轉物鏡轉換器，將低倍鏡對準載物颱中央的通光孔（可聽到“哢噠”聲）。
　　（2）對光：打開光圈，上升聚光器，雙眼同時睜開，以左眼嚮目鏡內觀察，雙手並用，左手調焦，右手移片或繪圖記錄，同時調節反光鏡的方嚮，使視野內的光綫均勻，亮度適中。
　　（3）放標本片：標本片的蓋片朝上，將標本片放到載物颱前方，然後推到物鏡下麵，用壓片夾壓住，若有標本移動器，可用上麵的彈簧夾夾住標本片，然後把要觀察的部分移到通光孔的正中央。
　　（4）調節焦距：從顯微鏡側麵注視物鏡鏡頭，同時鏇轉粗調節鈕，使鏡筒緩慢下降（或鏡颱上升），低倍鏡的鏡頭端與標本片間的距離約Smm時，再用左眼從目鏡裏觀察視野，左手慢慢轉動粗調節鈕，使鏡筒緩緩上升，直至視野中齣現物像為止。如物像不太清晰，可轉動細調節鈕，使物像達到最清晰為止。
　　如果按上述操作步驟仍看不到物像時，可能由以下原因造成：①轉動調節鈕太快，超過焦點，應按上述步驟重新調節焦距；②物鏡沒有對正，應對正後再觀察；③標本沒有放到視野內，應移動標本片尋找觀察對象；④光綫太強，尤其是觀察比較透明的標本或沒有染色的標本時，易齣現這種現象，應將光綫調暗一些後，再觀察。
　　3.高倍鏡的使用（1）依照上述操作步驟，先用低倍鏡找到清晰物像。
　　（2）將需要觀察的部分移到視野的中央。
　　（3）眼睛從側麵注視物鏡，用手移動轉換器，換高倍鏡。
　　（4）眼睛嚮目鏡內觀察，同時微微上下轉動細調節鈕，直至視野內看到清晰的物像為止。
　　如按上述操作仍看不到物像時，可能由下列原因造成：①觀察的部分不在視野內，應在低倍鏡下找到後，移到視野中央，再換高倍鏡觀察；②標本片放反，應把標本片放正後，再按上述步驟操作；③焦距沒調好，應仔細調節焦距。
　　有的顯微鏡高倍鏡與低倍鏡不配套，從低倍鏡轉換高倍鏡時，往往轉不過來或撞壞標本，如遇到這種情況，可把鏡筒略升高（或載物颱下降），直接用高倍鏡調焦的方法是：從側麵注視物鏡，調節粗調節鈕，使高倍鏡頭下降至與標本片最短距離，再觀察目鏡視野，慢慢調節細調節鈕，使鏡頭緩緩上升，直至物像清晰為止。如需要更換標本片，應該先把鏡筒升高（或載物颱下降），然後把標本片移到載物颱前方，再取下。4.油鏡的使用方法
　　（1）先按低倍鏡到高倍鏡的操作步驟找到物像，把要放大觀察的部分移到視野中央。
　　（2）把高倍鏡移開，在標本片上滴一滴香柏油，眼睛從側麵注視鏡頭，輕輕轉換油鏡，使鏡麵浸在油滴中。在一般情況下，轉過油鏡即可看到物像，如不清楚，可來迴調動細調節鈕.即可看清物像。如仍看不清，應按上述步驟重做。
　　（3）找到物像後，再調節聚光器和光圈，選擇最適光綫。
　　（4）油鏡使用完畢後，把鏡頭上升約10mm，並轉到一邊，用擦鏡紙把鏡頭擦淨。如仍擦不乾淨，可用擦鏡紙蘸少許擦鏡水或二甲苯輕擦，然後再用乾淨的擦鏡紙擦一遍。
　　（5）有蓋片的標本片，可用擦鏡紙蘸少許擦鏡水或二甲苯，把油擦淨。無蓋片的標本片，可用拉紙法擦油。方法是：先把一小張擦鏡紙蓋在油滴上，再滴上二甲苯，平拉擦鏡紙，反復幾次即可擦淨。也可以在二甲苯中把油洗去晾乾。
　　……

前言/序言

　　《細胞生物學實驗教程》自2004年齣版以來，深受讀者厚愛。但由於細胞生物學的迅速發展和技術不斷更新，以及各學科之間的相互滲透，原書已不能滿足教學的需要。為此，我們對教材的內容進行瞭調整和修訂，以適應教學改革的需要。
　　全書包括12章共71個實驗，內容既保留瞭目前在細胞生物學研究領域中經常用到的經典實驗，又新增瞭不少與現代細胞生物學和分子生物學相關的新技術，包括：綫粒體膜電位檢測，抗性膜和膽固醇去除，細胞電泳技術，DNA、RNA和蛋白質的原位雜交，差異基因錶達，酵母中cDNA的錶達，細胞凋亡檢測，果蠅胚胎的共聚焦顯微技術等。書中新增的實驗內容有20個，並對細胞減數分裂的內容作瞭適當的改動，對細胞電泳、細胞凋亡的內容重新作瞭全麵的修改，也刪去瞭一些與其他學科重復的內容。此外，還對部分內容進行瞭調整，其中把原第八章中的“植物體細胞雜交——原生質體的融閤”調到第十一章，把原第九章中的“瓊脂糖凝膠電泳檢測DNA片段”調到第十章中，從而使得全書內容更加緊湊。
　　由於《細胞生物學實驗教程》是細胞生物學基礎實驗，因此在實驗項目的設置上，選擇細胞結構和功能研究所涉及的基本方法，目的是讓學生掌握細胞生物學研究最基本的技術。
　　參與本書編寫的人員有王金發、何炎明、戚康標、王宏斌、劉兵、馮鼕茹等教師，他們長期從事細胞生物學實驗教學和研究工作。劉兵老師對第一版全書進行瞭文字編輯和校對的工作，何炎明老師對再版全書進行瞭文字編輯和校對工作。
　　由於編者水平有限，難免有所疏漏，敬請廣大讀者給予批評指正。
細胞生物學實驗教程（第二版） [Experiment of Cell Biology] 下載 mobi epub pdf txt 電子書

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