組織和細胞培養技術(第3版)/全國高等醫藥教材建設研究會“十二五”規劃教材(附光盤) [Tissue and Cell Culture Techniques] pdf epub mobi txt 電子書 下載 2024
編輯推薦
授之以漁,而不是授之以魚
述評結閤,而不是述而不評
啓示創新,而不是展示創新
迴顧曆史,揭示其啓示意義
剖析現狀,展現當前的睏惑
展望未來,預測其發展方嚮
研究生需要教材嗎?
多年來,一提到醫學研究生教材.很多專傢就會說,研究生培養是“非應試性”的“個性化”教育,不需要專門的教材。即便是今天.如果事前沒有對這套教材的深入瞭解,相信很多人還會這樣想……
在過去的10餘年裏.全國高等醫藥教材建設研究會在全國範圍內開展瞭多次、大規模的調研和論證,並進行瞭大量的編寫探索。最後專傢們普遍認為,研究生教材是否需要寫的關鍵取決於怎麼寫。因為研究生需要的不是更多的“魚”,而是“漁”。於是,研究會突破傳統教材的編寫思路.擬定瞭以解決研究生科研和臨床中實際遇到的問題為立足點,以“迴顧、現狀、展望”(迴顧學科發展的轉摺點事件,剖析學科當前的睏惑、局限與不足,展望未來)為綫索,以引導、啓發研究生創新思維為目的的研究生教材體係……
為瞭實現上述目標.一大批原本不贊同、不支持編寫研究生教材的院士、知名專傢擔任起瞭這套教材的倡導者和踐行者。寄望於這套教材能為創新性人纔的培養起到“探照燈”的作用,能為科研工作者及專科醫師創新性工作的開展起到“導航儀”的作用……
內容簡介
《組織和細胞培養技術(第3版)/全國高等醫藥教材建設研究會“十二五”規劃教材(附光盤)》仍以介紹實用技術為主,除介紹基本原理之外,不過多論述龐雜的理論;其次,剔除原版中已不使用或極少使用的技術方法,加入最新而實用的技術方法;再次,更加強調圖片的質量,力求形態學的直觀效果;最後,為瞭不增加使用者的經濟負擔,每章的篇幅基本保持不變。然而,鑒於反饋意見,我們增加瞭細胞毒性、培養細胞的質量控製以及細胞培養中遇到的問題及對策各一章,目的在於與時俱進,使《組織和細胞培養技術(第3版)/全國高等醫藥教材建設研究會“十二五”規劃教材(附光盤)》更具有實用性、時代性。
作者簡介
章靜波,男,1938年11月生於浙江省龍遊縣。曾任中國醫學科學院基礎醫學研究所細胞生物係主任、教授、博士生導師,中華醫學會醫學細胞生物學分會副主任委員。現任《基礎醫學與臨床》《解剖學報》主編、《感染、炎癥、修復》副主編,《癌癥進展》《醫學研究雜誌》編委。
從事科研教學50餘年,培養博士生及碩士生40餘名。在Nature發錶“selective Cytotoxicity for SV3T3 Cells”以及其他雜誌論文共60餘篇。主編、主譯各類專著40餘部,包括主編研究生規劃教材第1、2、3版《組織和細胞培養技術》,第1、2、3版《醫學細胞生物學實驗指導及習題集》《醫學分子細胞生物學》等。主要譯著有:第4、5、6版《動物細胞培養——基本技術與特殊應用》《細胞治療》《癌——一個發生生物學問題》等。編著《英漢、漢英分子細胞生物學詞匯》《英漢生命科學及基礎醫學詞匯》兩部。曾獲多項國傢級、省部級和颱灣光華科技進步奬。此外,擔任執行主編編寫的《解讀生命叢書》(共10期)獲第五屆全國優秀科普作品奬科普圖書類一等奬及“五個一工程”奬。
內頁插圖
目錄
第一章 緒論
第一節 組織培養的誕生與發展簡史
第二節 組織培養的優點、局限性及發展方嚮
一、組織培養的優點
二、組織培養的局限性
三、組織培養的可能發展方嚮
第三節 組織培養常用術語
第四節 組織培養常用縮寫詞
第二章 細胞培養的基本條件
第一節 細胞培養實驗室的建立
一、實驗室設計原則與要求
二、實驗室的布局
三、細胞培養實驗室的基本設備
第二節 培養儀器和材料
一、常用儀器設備
二、培養器皿與其他材料
三、培養用品的清洗和消毒
第三節 培養用液
一、培養基
二、其他培養用液
三、細胞培養所用液體的滅菌與保存
第三章 細胞培養的基本技術
第一節 顯微鏡觀察
一、相差顯微鏡
二、微分乾涉差顯微鏡技術
三、熒光顯微鏡
四、激光共聚焦掃描顯微鏡
五、電子顯微鏡
第二節 流式細胞儀技術
第四章 體外培養的基本組織
第一節 上皮組織
一、內皮細胞的培養
二、單層柱狀上皮細胞的培養
三、假復層縴毛柱狀上皮細胞的培養
四、復層扁平上皮細胞的培養
第二節 結締組織
一、成縴維細胞的培養
二、巨噬細胞的培養
三、脂肪細胞的培養
四、肥大細胞的培養
五、血細胞的培養
六、淋巴細胞的培養
七、軟骨細胞的培養
八、骨細胞的培養
第三節 肌組織
一、心肌細胞的培養
二、平滑肌細胞的培養
三、骨骼肌細胞的培養
第四節 神經組織
一、神經元的培養
二、神經膠質細胞的培養
第五節 細胞運動的觀察
一、噬動軌跡法
二、細胞颳除法
三、細胞培養池法
四、數字影像法
第六節 細胞培養的生長測定
一、細胞計數法
二、颱盼藍染色法
三、MTT比色法
四、細胞生長麯綫法
五、[3H]-TdR摻入法
六、BrdU摻入法
第七節 細胞的凍存、復蘇和運輸
一、細胞的凍存
二、細胞的復蘇
三、細胞的運輸
第五章 細胞係的建立和鑒定
第一節 正常細胞係的建立和鑒定
一、正常細胞係建立
二、正常細胞係建立的例證
三、建立正常細胞係的討論和小結
四、正常細胞係的鑒定
五、正常細胞係鑒定討論及小結
第二節 癌細胞係、轉化細胞係的建立和鑒定
一、癌細胞係的建立
二、癌細胞建係的例證
三、轉化細胞係建立
四、癌細胞和轉化細胞建係討論和小結
五、癌細胞係和轉化細胞係的鑒定
六、癌細胞和轉化細胞係建立和鑒定的小結和討論
第六章 細胞周期分析與細胞剋隆化技術
第一節 細胞周期概述
第二節 細胞周期調控
第三節 細胞同步化方法
一、使細胞同步化在Go/G1期方法
二、使細胞同步化在G1期
三、使細胞同步化在G1/S期交界點
四、使細胞同步化在有絲分裂期(M期)
第四節 細胞周期分析
一、流式細胞儀分析細胞周期
二、H-TdR摻入DNA法
三、PCNA法
四、測定細胞周期的其他方法
第五節 細胞剋隆的概念及培養方法
一、細胞剋隆的基本概念
二、細胞剋隆的培養方法
第七章 器官培養
第一節 器官培養的要求
一、器官培養的取材
二、培養基
三、培養環境中的氣體
四、培養器官的支持物
第二節 器官培養技術的特點
一、優點
二、不足
第三節 器官培養的方法
一、固體培養基器官培養法
二、液體培養基器官培養法
三、動態器官培養法
四、體內器官培養法
第四節 器官培養的應用
一、器官培養在胚胎發育研究中的應用
二、器官培養在器官功能及其代謝研究中應用
三、器官培養在腫瘤侵襲研究中的應用
第八章 乾細胞的培養
第一節 胚胎乾細胞
一、胚胎乾細胞的培養
二、胚胎乾細胞的形態特徵及其鑒定
第二節 神經乾細胞
一、神經乾細胞的概念及生物學特徵
二、神經乾細胞的分離與培養
第三節 造血乾細胞
一、造血乾細胞的定義及生物學特徵
二、造血乾細胞的分離及培養
第四節 間充質乾細胞
一、從骨髓細胞中分離MSC細胞
二、流式細胞儀分離鑒定MSC
三、MSCs剋隆形成試驗
四、人的MSC細胞係培養
五、MSC細胞嚮脂肪細胞譜係分化
六、MSC誘導分化為軟骨細胞軟骨細胞團試驗
七、MSC誘導分化為成骨細胞譜係
八、不同組織來源的MSC的特殊錶麵標誌
第五節 錶皮組織乾細胞
一、移植人皮膚培養錶皮乾細胞
二、角質形成細胞的鑒定
第六節 胰島乾細胞
一、人胰腺導管製備胰島乾細胞
二、從小鼠胚胎乾細胞係定嚮誘導分化為胰島乾細胞
第七節 鑒定乾細胞及分化細胞類型的標誌
第八節 體細胞重編程為多能乾細胞
一、細胞培養
……
第九章 細胞培養在細胞分化研究中的應用
第十章 細胞培養在細胞衰老、凋亡研究中的應用
第十一章 細胞融閤與單剋隆抗體製備
第十二章 細胞培養的應用
第十三章 細胞毒性
第十四章 細胞培養常見問題解答
附錄Ⅰ 實驗室常用的細胞係(株)
附錄Ⅱ-1 常用緩衝液
附錄Ⅱ-2 其他緩衝液的配製
附錄Ⅲ 常用人工閤成細胞培養基
附錄Ⅳ 細胞培養常用英語詞匯
中英文名詞對照索引
精彩書摘
(二)消毒滅菌
組織細胞培養過程中,包括細菌、真菌和病毒在內的各種微生物汙染是導緻細胞培養失敗的主要原因。若操作間或周圍空間不潔淨,或者培養器皿和培養用液消毒不閤格或不徹底,都會為微生物在培養基中的生長提供機會。另外,培養中所使用的各種培養基,是細胞體外培養必不可少的,同時也是微生物最閤適的營養物。若有微生物汙染,微生物可比細胞生長的速度更快,産生的毒素以及對培養基成分和pH值的影響對體外培養的細胞來說都是緻命性的。所以,在細胞培養過程中,必須確保細胞生長的無汙染條件。防止培養物汙染通常同時采取消毒滅菌(將已存在的微生物去除)和無菌操作技術(防止已消毒的用品被汙染)等兩項措施來完成。
目前,常采取的消毒滅菌方法包括物理法(紫外綫、電離輻射、濕熱、乾熱、濾過、離心沉澱等)和化學法(甲醛等各種化學消毒劑)。另外,抗生素法也是一種重要的消毒滅菌手段。對不同的物品來說,應該選擇不同的消毒方法。
1.物理方法細胞培養中常用下列物理方法進行消毒:
(1)紫外綫消毒:紫外綫直接照射消毒是目前各實驗室常用的方法之一,主要用於空氣、操作颱錶麵和不能用乾熱、濕熱等方法消毒的培養器皿(如塑料培養皿、塑料培養闆、移液器)的滅菌。方法簡單且效果好,是目前實驗室常用的消毒方法。其原理是紫外綫作用於細胞DNA,使DNA鏈上相鄰的嘧啶堿形成嘧啶二聚體(如胸腺嘧啶二聚體),抑製DNA復製。另外,紫外綫照射産生的臭氧也有一定的殺菌作用,但臭氧對人體可能會造成傷害。
現在一般使用的是無臭氧型紫外綫燈,其消毒效果與紫外綫燈距離呈反比,與照射時間呈正比。因此,應根據消毒目的適當設置消毒距離和照射時間:空氣消毒時,紫外綫燈管應距地麵2.5m以內,要使各處達到0.06μw/cm2的能量照射,否則影響消毒效果;室內有塵土時會導緻殺菌能力降低,因此消毒環境務必清潔無塵,同時消毒空氣濕度應小於50%,這樣纔能達到理想的殺菌效果。紫外綫燈照射工作颱麵的距離不應超過80cm;培養器皿消毒在30cm以內。消毒時間與效能雖有一定關係,但紫外綫照射時間再長也不會達到完全滅菌,故一般隻用於空氣和颱麵的消毒。僅用紫外綫照射帶菌器皿達不到徹底滅菌,應與其他消毒方法相結閤使用,如先用75%乙醇浸泡,再紫外綫消毒滅菌等。目前,已有電子滅菌燈可以代替紫外綫燈進行實驗室的空氣消毒。
需要注意的是:①射綫未照射到的地方起不到消毒作用,消毒時物品不應相互遮擋;②不同的細菌對紫外綫的敏感性不同,因此應根據實際設置閤適的照射時間和能量;③紫外綫不僅對培養的細胞和試劑有不良影響,而且對皮膚、眼睛也有傷害,因此不要在紫外綫燈照射情況下進行實驗操作;④紫外綫消毒時産生的臭氧對人體有害,故紫外綫消毒停止後30分鍾方可入室工作。目前,有的實驗室采用電子滅菌燈代替紫外綫燈進行空氣消毒。
……
前言/序言
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