(1)研究人員可根據具體條件決定是用普通細胞還是用純化T細胞作為應答細胞。普通細胞代錶免疫細胞(包括巨噬細胞)所有補體,能夠將同種異體抗原間接呈遞給T細胞。與此相反,使用純化T細胞檢測ADSC作為抗原呈遞細胞的能力需要呈遞MHC分子同種異體抗原和錶達共刺激分子。從技術角度來講,純化T細胞在低背景下對自體/同種細胞會産生更明顯的效果,而對同種異基因細胞會産生更高的反應。使用普通細胞作為反應細胞可能與體內應答復製相關。從實踐經驗來講,普通人PBMC對同種異基因BMSC産生的反應要高於同一供體來源的T細胞。
(2)由於樣品在孔內沉積,很難從96孔微滴闆中獲取共培養的T細胞和ADSC,當“自動”獲取細胞時,沉積物會阻礙過濾,引起孔內物溢齣。為瞭方便培養,通常使用細胞收集器的“手動”模式在洗滌前吸取沉積物。
(3)如果反應細胞單獨培養或與自體/同種細胞共培養産生高背景的反應(>1000cpm),有可能是培養液中存在有絲分裂或抗原成分等,如FBS。如果使用同源血清,則建議篩選齣其他血清。培養期長也會導緻高背景反應。因此,應該確定短期培養是否適用於本實驗。
(4)使用供體反應細胞與刺激細胞的不同結閤,可能增加同種異基因細胞的低陽性對照反應(< 10000cpm)。這些問題可以通過改變反應一刺激細胞比率,增加每孔細胞數,改變培養液中的血清成分或增加背景的FBS,以及調整培養時間或使用純化T細胞作為反應細胞等方法解決。
评分
评分
评分
评分
评分
评分
评分
评分
本站所有內容均為互聯網搜索引擎提供的公開搜索信息,本站不存儲任何數據與內容,任何內容與數據均與本站無關,如有需要請聯繫相關搜索引擎包括但不限於百度,google,bing,sogou 等
© 2025 tushu.tinynews.org All Rights Reserved. 求知書站 版权所有