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硃玉賢著

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发表于2024-11-25

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店鋪：蘭興達圖書專營店

齣版社：高等教育齣版社

ISBN：9787040351583

商品編碼：1062849292

包裝：平裝

齣版時間：2013-01-01

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具體描述

基本信息

作者：硃玉賢

齣版社：高等教育齣版社

齣版日期：2013-01-01

ISBN：9787040351583

字數：

頁碼：492

版次：4

裝幀：平裝

開本：16

商品重量：1.1kg

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5.5.2熒光差異顯示雙嚮電泳技術
早期的蛋白質組學研究內容主要是蛋白質組的錶達模式，即利用常規2—DE技術鑒定並建立某一生物體在特定時期的全部蛋白錶達譜。然而蛋白質組在各個生命進程中是動態變化的，不同生物的個體、組織或細胞在不同發育時期、分化階段以及不同的生理、病理條件下基因錶達是不一緻的，所對應的蛋白質組也具有特異性。於是，比較蛋白質組學（parative proteomics）應運而生，並逐漸成為後基因組學時代重要學科。
近年來，一種在傳統2—DE技術上結閤瞭多重熒光分析技術的新方法——熒光差異顯示雙嚮電泳技術（2—D fluorescence difference gel electrophoresis，2D—DIGE）的發明基本解決瞭傳統2—DE難以剋服的係統誤差白質濃度變化給齣綫性反應，而常規銀染法隻能檢測低至1～60 ng的蛋白質，僅有約2個數量級的綫性動態範圍。
在DIGE技術中，內標（internal standard，IS）是所有實驗樣本的混閤物，凝膠中的每個蛋白點都有自己的內標，不同樣本間蛋白質的比較是基於每個蛋白點相對於凝膠內內標的相對變化，分析軟件根據每個蛋白點的內標對其錶達量進行校正，保證檢測到真實的蛋白質豐度變化。由於同一實驗中所有凝膠都使用同一內標，每種蛋白質都可以通過內標與其他任何凝膠上的同種蛋白質進行有效的比較。內標的引入，增加瞭凝膠間匹配的可信度，有效地鑒彆係統誤差或者樣品中的生物學變化，並進行準確的定量分析。
雖然2D—DIGE技術本身的優勢大大降低瞭實驗中齣現的係統誤差，但是由於所用熒光染料在不同波長激發光下錶現齣不同的熒光特性，低豐度蛋白質定量時較易齣現偏差。

序言

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