“十二五”國傢重點圖書齣版規劃項目·中國科學技術大學精品教材：生物化學與分子生物學實驗 pdf epub mobi txt 电子书 下载 2025

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李衛芳 等 著

圖書標籤:

• 生物化學
• 分子生物學
• 實驗
• 高等教育
• 教材
• 科學技術大學
• 生物科學
• 醫學
• 教學參考
• “十二五”規劃項目

出版社： 中国科学技术大学出版社

ISBN：9787312029653

版次：1

商品编码：10923864

包装：平装

开本：16开

出版时间：2012-01-01

用纸：胶版纸

页数：234

正文语种：中文

內容簡介

《“十二五”國傢重點圖書齣版規劃項目·中國科學技術大學精品教材：生物化學與分子生物學實驗》主要內容由學院多年使用的《生物化學與分子生物學基礎實驗講義》及《生物化學與分子生物學高級講義》綜閤選編而成。本書包括基礎實驗和綜閤實驗兩個部分，涵蓋瞭生物化學與分子生物學的教學大綱的要求，從實驗設計、實驗選材到實驗操作，都經曆過多次的教學實踐證實，很多實驗內容由科研成果直接轉化而來，是作者多年教學和科研經驗的積纍。
《“十二五”國傢重點圖書齣版規劃項目·中國科學技術大學精品教材：生物化學與分子生物學實驗》適閤作為生命科學類專業及相關專業的本科生教材，重在基礎實驗和基礎技能方麵，旨在培養學生解決實際問題的能力和創新能力，為學生日後的畢業實習和科學研究奠定堅實的實驗技術基礎。

目錄

總序
前言
第一部分 基礎實驗
實驗一 蛋白質的定量測定
實驗二 核酸的定量測定
實驗三 糖的定量測定
實驗四 不同去汙劑對紅血球細胞膜的溶解作用比較
實驗五 凝膠過濾層析柱的裝填及柱效測定
實驗六 葡聚糖凝膠柱層析
實驗七 離子交換柱層析法分離蛋白質
實驗八 硫酸銨分級沉澱法分離純化Rubisco蛋白
實驗九 聚丙烯酰胺凝膠電泳（Native-PAGE）分離植物過氧化物酶同工酶（活性染色法）
實驗十 SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳（SDS-PAGE）法測定蛋白質的分子量
實驗十一 等電聚焦電泳（IEF）
實驗十二 雙嚮聚丙烯酰胺凝膠電泳（2D－PAGE）
實驗十三 酶聯免疫吸附測定法（ELISA）
實驗十四 蛋白質免疫印記（Western Blotting）
實驗十五 交聯法（Cross-linking）鑒定蛋白質的聚集特性
實驗十六 肌動蛋白的體外聚閤和共沉降
實驗十七 用正交法測定幾種因素對酶活力的影響
實驗十八 酸性磷酸酯酶動力學性質的分析
實驗十九 質粒DNA的提取
實驗二十 質粒DNA的酶切與鑒定
實驗二十一 PCR基因擴增
實驗二十二 DNA樣品的膠迴收及連接
實驗二十三 大腸杆菌感受態細胞的製備及轉化
實驗二十四 釀酒酵母總RNA的提取、純化與鑒定
實驗二十五 反轉錄PCR（RT-PCR）和實時熒光定量PCR（QRT-PCR）

第二部分 綜閤實驗
實驗二十六 葡萄糖異構酶（GI）基因的剋隆、錶達及GI的純化與性質鑒定

附錄
附錄一 實驗室用水常識
附錄二 玻璃器皿的洗滌和常用洗液的配製
附錄三 常見市售酸堿的濃度
附錄四 國際相對原子質量錶（2001）
附錄五 緩衝液的配製
附錄六 硫酸銨飽和度常用錶
附錄七 常用分子量標準參照
附錄八 常用核酸蛋白數據換算
附錄九 柱層析介質的技術參數
附錄十 電泳相關的常用緩衝液的配製
附錄十一 常用培養基
附錄十二 常用抗生素
附錄十三 分子生物學常用軟件
附錄十四 學生實驗守則
附錄十五 生物化學與分子生物實驗室安全及防護知識

前言/序言

《生物化學與分子生物學實驗》精選教材導讀：構建紮實的科研基石 本書概述 本教材精選瞭當前生物化學與分子生物學領域中最具代錶性、最核心的實驗技術與操作規程。它並非是對某一特定領域進行深入的理論闡述，而是緻力於為學習者提供一個全麵而實用的實驗技能訓練平颱。本書的編寫旨在彌閤理論學習與實際操作之間的鴻溝，通過詳盡的步驟指導和深入的原理剖析，幫助學生和初級研究人員快速掌握現代生命科學研究的必備技能。 第一部分：基礎技術與通用操作——奠定實驗根基 本部分聚焦於生物化學與分子生物學實驗中最為基礎但至關重要的通用技術，它們是後續所有復雜實驗的邏輯起點和技術支撐。 1. 緩衝液與溶液配製技術： 精確的pH控製是生物化學實驗成功的關鍵。本章詳細介紹瞭各類生物緩衝體係（如Tris-HCl、磷酸鹽緩衝液、HEPES等）的理論基礎，包括Henderson-Hasselbalch方程的應用。重點闡述瞭如何根據實驗需求（如酶反應、蛋白質溶解、核酸穩定性要求）精確計算所需原料的量，並掌握使用pH計的標準操作流程，包括電極的校準、維護與使用中的注意事項，確保緩衝液的穩定性與準確性。此外，對不同級彆水（去離子水、蒸餾水、超純水）的適用場景進行瞭區分說明。 2. 常用無菌操作技術： 微生物汙染是分子生物學實驗中的主要障礙。本部分係統介紹瞭超淨工作颱（生物安全櫃）的正確使用、火焰滅菌技術、液體和固體培養基的無菌分裝。重點講解瞭酵母、大腸杆菌等模式生物的接種、傳代和保藏方法。強調瞭個人防護裝備（PPE）的規範穿戴和操作流程中的“無菌操作區”概念的建立與維護，以最大限度地減少環境微生物的引入。 3. 離心分離技術： 離心是實現生物大分子和細胞分離純化的核心手段。本章全麵介紹瞭低速、高速和超速離心機的原理、結構及安全操作規範。詳細對比瞭水平轉子和角式轉子的特性差異及其對沉降係數的影響。對於密度梯度離心（如蔗糖密度梯度和Ficoll梯度），詳細描述瞭如何根據目標物質的密度精確配製梯度，並講解瞭如何根據沉降時間計算所需的相對離心力（RCF）。 第二部分：蛋白質研究的實驗核心技術 本部分深入探討瞭蛋白質的提取、分離、鑒定與定量分析的係列技術，這是理解生命活動分子機製的基石。 1. 蛋白質提取與粗純化： 針對不同來源（細菌、動植物組織、細胞培養物）的樣本，本章介紹瞭溫和和強力裂解方法的選擇。詳細對比瞭機械法（勻漿、超聲波）、酶解法（溶菌酶、蛋白酶K）和化學法（去汙劑、變性劑）的優缺點及適用性。重點講解瞭如何優化裂解緩衝液的成分（如加入蛋白酶抑製劑Cocktail、還原劑DTT/β-巰基乙醇）以防止蛋白質降解和失活。 2. 電泳分離技術（SDS-PAGE與等電聚焦）： SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳（SDS-PAGE）是分析蛋白質分子量和純度的金標準技術。本章不僅教授瞭凝膠的配製（如APM的聚閤反應控製），還詳細解析瞭電泳緩衝液的緩衝係統、樣品製備（還原性與非還原性處理）和上樣流程。對於更精細的分離，等電聚焦（IEF）技術被引入，闡述瞭其基於蛋白質等電點（pI）的原理，以及雙嚮電泳（2D-PAGE）的完整操作流程和成像技術。 3. 蛋白質定量與活性測定： 準確測定蛋白質濃度是後續實驗的先決條件。本章詳細介紹瞭紫外吸收法（A280nm）、Bradford法、Lowry法和BCA法的原理及其適用範圍。特彆強調瞭不同試劑對乾擾物質（如去汙劑、還原劑）的敏感性，以及如何通過標準麯綫進行準確校準。同時，針對酶學研究，介紹瞭底物檢測法（如對硝基苯酚底物）和偶聯反應法來測定酶的比活力。 第三部分：核酸操作與基因工程基礎 本部分聚焦於遺傳物質的提取、修飾、增殖與分析，是分子生物學研究的核心領域。 1. 基因組DNA和質粒DNA的提取純化： 本章區分瞭從原核細胞、真核細胞組織和血液中提取高分子量基因組DNA的SOP。重點介紹瞭基於有機溶劑（酚/氯仿）萃取法與基於矽膠柱的快速提取法的原理差異與操作細節。對於質粒DNA的提取，詳述瞭堿裂解法的關鍵步驟（如超螺鏇DNA的保持）以及不同類型的質粒（高拷貝、低拷貝）所需的處理差異。 2. PCR技術及其變體： 聚閤酶鏈式反應（PCR）是核酸擴增的基石。本章詳細解釋瞭熱循環儀的程序設置邏輯，包括引物退火溫度（Tm）的計算與優化。重點介紹瞭應對復雜模闆的挑戰，如Touchdown PCR和熱啓動PCR的應用。此外，對實時熒光定量PCR（qPCR）的原理、熒光染料（SYBR Green）和探針技術（TaqMan）的選擇與定量分析方法進行瞭詳盡的闡述。 3. 瓊脂糖凝膠電泳與核酸的可視化： 本章教授如何根據目標DNA片段的大小選擇閤適的瓊脂糖濃度，並介紹瞭溴化乙錠（或替代品）的安全使用與DNA條帶的分析、切膠迴收技術。強調瞭電泳緩衝液的緩衝能力對遷移速度的影響，以及如何利用DNA Marker進行準確的分子量判斷。 第四部分：現代生物學研究中的整閤應用 本部分將基礎技術有機結閤，介紹瞭幾種在當代研究中廣泛使用的綜閤性技術流程。 1. 蛋白質與核酸的印跡分析（Western & Southern Blot）： 詳細描述瞭蛋白質轉移（轉膜）技術，包括轉膜槽的搭建、膜的選擇（PVDF與NC膜）以及濕法與乾法轉膜的優缺點。講解瞭抗體孵育的封閉步驟、一抗二抗的選擇與優化，以及化學發光檢測係統的顯影過程。對於Southern Blot，則側重於探針的標記（放射性與非放射性）和雜交條件（溫度與鹽濃度）的精確控製。 2. 基因剋隆與載體構建基礎： 本章介紹瞭限製性內切酶的酶切反應條件優化（如溫度、鹽濃度和配套緩衝液的選擇），以及T4 DNA連接酶的反應原理。重點闡述瞭如何設計正嚮和反嚮引物以引入特定的限製性內切酶位點，並演示瞭“粘性末端連接”和“平末端連接”的實踐操作流程。 結語 本書旨在作為一本“動手”的指導手冊，而非純粹的理論參考書。每項實驗都配有詳細的故障排除指南（Troubleshooting），預測學習者在實踐中可能遇到的問題，並提供切實可行的解決方案。通過係統的訓練，讀者將能夠獨立設計、執行和分析復雜的生物化學與分子生物學實驗，為未來的科研工作打下堅實的技術基礎。

评分☆☆☆☆☆

這本書給我的整體感受就是“紮實”和“前沿”。作為一本“精品教材”，它在內容的選擇上無疑是經過瞭嚴格的篩選，既有生物化學與分子生物學領域的經典實驗，也有一些近年來發展起來的新技術和新方法。這讓我感覺自己學習到的知識是與時俱進的，能夠跟上學科發展的步伐。而且，書中的內容邏輯清晰，層次分明，從易到難，層層遞進，非常適閤學生循序漸進地學習。我尤其欣賞書中對於實驗結果的討論部分，它不僅僅是給齣參考答案，而是引導讀者去思考實驗結果的意義，以及可能存在的誤差來源，這極大地培養瞭我們的批判性思維和獨立思考能力。這本書無疑為我在生物化學與分子生物學領域打下瞭堅實的基礎。

评分☆☆☆☆☆

這本書給我的感覺就像一個寶庫，裏麵蘊藏著無數珍貴的知識財富。我之前做過一些零散的實驗，但總是覺得不夠係統，很多操作技巧掌握得也不夠紮實。這本書的齣現，就像是給我點亮瞭一盞明燈。它在實驗設計上非常精巧，每個實驗都圍繞著一個核心的科學問題展開，既能驗證理論知識，又能鍛煉實驗技能。而且，書中提供瞭詳細的數據分析和結果解釋的指導，這對於我們這些初學者來說尤為重要，能夠幫助我們學會如何正確地解讀實驗結果，並從中得齣有價值的結論。我發現，通過這本書的學習，我不僅掌握瞭許多常用的生物化學與分子生物學實驗技術，更重要的是，我的科學思維和解決問題的能力得到瞭極大的提升，學會瞭如何係統地思考和設計實驗。

评分☆☆☆☆☆

作為一名剛剛接觸生物化學與分子生物學實驗的學生，我常常感到無從下手，很多理論知識讀起來生澀難懂，直到我看到瞭這本書。它的語言風格非常友好，就像一位經驗豐富的老師在循循善誘，沒有絲毫的說教感。每個實驗項目的講解都非常細緻，從實驗目的、原理，到儀器設備、試劑準備，再到具體的實驗步驟，都講解得清清楚楚，甚至連一些容易齣錯的細節都一一指齣。更重要的是，書中穿插瞭很多圖示和流程圖，這極大地降低瞭理解的難度，讓抽象的實驗過程變得形象生動。我特彆喜歡它在實驗操作指導之外，還結閤瞭大量相關的背景知識和延伸閱讀，這讓我不僅僅是在完成實驗，更是在理解實驗背後的科學意義，能夠將書本知識與實際操作緊密結閤起來，這種學習方式讓我覺得既高效又有趣。

评分☆☆☆☆☆

這本書的實用性是我最看重的一點。很多實驗教材在理論講解上大同小異，但真正到瞭動手操作的時候，卻常常會遇到各種問題。這本書則完全不同，它將理論與實踐完美地結閤在一起，給齣的實驗方案都經過瞭反復的驗證，非常具有可操作性。書中對每個實驗的注意事項都交代得非常清楚，比如試劑的配製、儀器的校準、操作過程中的關鍵步驟等等，這些細節都能夠幫助我們避免很多不必要的錯誤，從而提高實驗的成功率。更令我欣喜的是，書中還提供瞭一些常見的實驗故障排除指南，這對於我們在實驗中遇到突發情況時，能夠迅速找到解決方法，大大減少瞭實驗的挫敗感。

评分☆☆☆☆☆

這本書名真是夠分量，讓我對它充滿瞭期待。首先，封麵設計就透著一股嚴謹和專業，簡約而不失大氣，一眼就能看齣是齣自名傢之手。翻開目錄，看到清晰的章節劃分和實驗項目的命名，就覺得心裏踏實瞭不少。我一直對生物化學和分子生物學這塊兒特彆感興趣，但總覺得理論知識像是一盤散沙，缺乏實踐的支撐，難以融會貫通。這本書恰好彌補瞭這一塊的缺失，提供瞭大量精心設計的實驗，涵蓋瞭從基礎的酶學反應到復雜的基因剋隆等，這對於我們這些想在理論和實踐之間搭建橋梁的學生來說，簡直是雪中送炭。而且，聽說是“十二五”國傢重點圖書齣版規劃項目，又是中國科學技術大學的精品教材，這雙重保障讓我覺得這本書的質量絕對是杠杠的，內容編排的科學性和前沿性都有瞭保證。

评分☆☆☆☆☆

1百年帝国

评分☆☆☆☆☆

图11是在上世纪90年代拍摄的美国新泽西州弗伦翰公园()日落时的照片。弗伦翰公园占地十几平方公里，大多是芳草地和森林，在森林中央，是一片中等规模临湖的工业园一这是笔者见到最美丽的工业园。在那里，每天都能看到天鹅在湖中悠闲地游荡，还不时可以见到野鹿出没。这里原是石油巨头埃克森美孚(-)的地产，1996年，这里来了一个新主人一美国电报和电话公司()实验室。1995年，如日中天的公司重组，分裂成、朗讯和三家公司。下属的举世闻名的科研机构贝尔实验室也被一分为二。朗讯公司获得了一半的科研机构和贝尔实验室的名称。划归的一半研究室组成了实验室(后来更名为香农实验室)，从原来的默里山()搬到了弗伦翰公园。在那里，出过11位诺贝尔奖获得者的实验室，像一颗进入晚年的恒星，爆发出极强的、但也是最后的光辉，然后就迅速地暗淡下来。10年后，和朗讯()公司分别被公司和法国的阿尔卡特()公司并购。

评分☆☆☆☆☆

图11是在上世纪90年代拍摄的美国新泽西州弗伦翰公园()日落时的照片。弗伦翰公园占地十几平方公里，大多是芳草地和森林，在森林中央，是一片中等规模临湖的工业园一这是笔者见到最美丽的工业园。在那里，每天都能看到天鹅在湖中悠闲地游荡，还不时可以见到野鹿出没。这里原是石油巨头埃克森美孚(-)的地产，1996年，这里来了一个新主人一美国电报和电话公司()实验室。1995年，如日中天的公司重组，分裂成、朗讯和三家公司。下属的举世闻名的科研机构贝尔实验室也被一分为二。朗讯公司获得了一半的科研机构和贝尔实验室的名称。划归的一半研究室组成了实验室(后来更名为香农实验室)，从原来的默里山()搬到了弗伦翰公园。在那里，出过11位诺贝尔奖获得者的实验室，像一颗进入晚年的恒星，爆发出极强的、但也是最后的光辉，然后就迅速地暗淡下来。10年后，和朗讯()公司分别被公司和法国的阿尔卡特()公司并购。

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很喜欢:..吴军1.吴军，他的每一本书几本上都有，这本浪潮之巅很不错，近一百多年来，总有一些公司很幸运地、有意识或无意识地站在技术革命的浪尖之上。在长达十年甚至几十年的时间里，它们代表着科技的浪潮，直到下一波浪潮的来临。从19世纪末算起，公司、公司、苹果公司、英特尔公司、微软公司、思科公司、雅虎公司和公司都先后被幸运地推到了浪尖。虽然，它们来自不同的领域，中间有些已经衰落或正在衰落，但是它们都极度辉煌过。吴军的这本浪潮之巅系统地介绍了这些公司成功的本质原因及科技工业一百多年的发展。在这些公司兴衰的背后，有着它必然的规律。浪潮之巅不仅讲述科技工业的历史，更重在揭示它的规律性。浪潮之巅梳理了产业发展的历史脉络，叙述了美国硅谷明星公司的兴衰沉浮。通过对各大公司从技术轨迹到经营理念的剖析，作者想向读者展现的并不仅仅是一幅有关科技产业更迭和大公司成长规律的历史景观，而是为了让中国的读者能更真实地了解美国、了解科技产业，以此理解科技创新和商业公平在美国文化生活中的深刻意义。第1章帝国的余晖

评分☆☆☆☆☆

中国科技大学建校50周年精品作品，校长作序。很不错，应急用。

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1百年帝国

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很喜欢:..吴军1.吴军，他的每一本书几本上都有，这本浪潮之巅很不错，近一百多年来，总有一些公司很幸运地、有意识或无意识地站在技术革命的浪尖之上。在长达十年甚至几十年的时间里，它们代表着科技的浪潮，直到下一波浪潮的来临。从19世纪末算起，公司、公司、苹果公司、英特尔公司、微软公司、思科公司、雅虎公司和公司都先后被幸运地推到了浪尖。虽然，它们来自不同的领域，中间有些已经衰落或正在衰落，但是它们都极度辉煌过。吴军的这本浪潮之巅系统地介绍了这些公司成功的本质原因及科技工业一百多年的发展。在这些公司兴衰的背后，有着它必然的规律。浪潮之巅不仅讲述科技工业的历史，更重在揭示它的规律性。浪潮之巅梳理了产业发展的历史脉络，叙述了美国硅谷明星公司的兴衰沉浮。通过对各大公司从技术轨迹到经营理念的剖析，作者想向读者展现的并不仅仅是一幅有关科技产业更迭和大公司成长规律的历史景观，而是为了让中国的读者能更真实地了解美国、了解科技产业，以此理解科技创新和商业公平在美国文化生活中的深刻意义。第1章帝国的余晖

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