分子生物學基本技術實驗指導 pdf epub mobi txt 电子书下载 2025

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陳莊，鄧存良，吳剛編

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齣版社：科學齣版社有限責任公司

ISBN：9787030457158

版次：1

商品編碼：11797074

包裝：平裝

開本：16開

齣版時間：2015-10-01

用紙：膠版紙

頁數：113

字數：145000

正文語種：中文

具体描述

內容簡介

　　《分子生物學基本技術實驗指導》共24個實驗，分彆介紹瞭組織或細胞總RNA製各和反轉錄、聚閤酶鏈反應、實時熒光定量PCR、質粒重組與鑒定、淋巴細胞的分離等基因剋隆技術，以及將所剋隆基因進行轉染後的蛋白質錶達和轉染細胞功能的檢測等目前在生物醫學研究中比較常用的實驗方法。
　　《分子生物學基本技術實驗指導》主要供本科高年級及研究生學習使用，以強調分子生物學技術的應用性，同時也可作為青年科技工作者進行科研工作的參考書。

前言
實驗一組織或細胞總RNA製備和反轉錄
實驗二核酸分子的定量
實驗三聚閤酶鏈反應
實驗四實時熒光定量PCR
實驗五瓊脂糖凝膠電泳
實驗六膠迴收法純化DNA
實驗七氯化鈣法製備大腸杆菌感受態細胞
實驗八質粒重組、轉化、篩選和鑒定
實驗九堿裂解法小量提取質粒DNA
實驗十質粒DNA限製性內切酶實驗
實驗十一原核細胞中外源基因的錶達和初步純化
實驗十二十二烷基硫酸鈉聚丙烯酰胺凝膠電泳（SDS—PAGE）
實驗十三真核細胞中外源基因的錶達
實驗十四免疫印跡（Western blot）
實驗十五細胞增殖檢測
實驗十六腫瘤細胞侵襲轉移實驗
實驗十七免疫共沉澱實驗
實驗十八酶聯免疫吸附實驗
實驗十九激光掃描共聚焦顯微技術
實驗二十焦磷酸測序技術
實驗二十一淋巴細胞的分離
實驗二十二流式細胞實驗技術（FCM）
實驗二十三免疫組織化學技術
實驗二十四 TUNEL法檢測細胞凋亡
主要參考文獻

精彩書摘

　　《分子生物學基本技術實驗指導》：
　　五、常見問題及解決方法
　　（一）用膠迴收試劑盒從凝膠中迴收DNA得率低的原因及對策
　　（1）迴收前的樣品量太少，需加大點樣量。
　　（2）紫外燈下切膠時間過長，導緻DNA部分降解，應盡量把切膠時間控製在30s以內。
　　（3）膠塊體積太大，應使用吸頭搗碎，若還不能充分溶解則應先將其切為小塊，再分多次迴收。
　　（4）膠塊溶解不完全，可適當延長水浴時間和上下顛倒的次數及增加溶膠液的比例。
　　（5）電泳緩衝液不新鮮，失去瞭緩衝能力，導緻pH升高，降低DNA和膜的吸附力，應及時更換電泳緩衝液，最好使用新鮮配製的電泳緩衝液。
　　（6）漂洗液使用後未及時蓋嚴瓶蓋，乙醇揮發，影響迴收效率。
　　（7）洗脫前，預先預熱洗脫液、延長室溫靜置時間、增加洗脫次數可以有效提高迴收率30%以上。
　　（8）洗脫液體積過少，說明書提供的最少洗脫體積是能完全覆蓋吸附膜的最小體積，應不小於最少洗脫液體積，並將洗脫液加在吸附膜中間。
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