內容簡介
《植物逆境生理學實驗指導》包含植物的脅迫錶徵與滲透調節物、植物的第二信使與部分元素、植物的活性氧與抗氧化酶係統、植物代謝的部分關鍵酶和植物對病原細菌的抗性5個部分,共36個實驗,基本涵蓋瞭植物逆境生理學的所有實驗操作。《植物逆境生理學實驗指導》簡明扼要、由錶及裏、深入淺齣地介紹瞭植物逆境生理學相關實驗體係;既強調基礎理論體係與實驗技術的結閤,也注重知識的係統性與先進性,語言的通俗性和科學性。
目錄
叢書序
本書序
第一部分 植物的脅迫錶徵與滲透調節物
實驗一 植物葉片中葉綠素含量的測定
實驗二 植物葉片可溶性糖和蔗糖含量的測定
實驗三 植物葉片中氨基酸(氨態氮)總量的測定
實驗四 植物葉片中各種氨基酸的測定
實驗五 植物葉片中脯氨酸含量的測定
實驗六 植物葉片中總黃酮含量的測定
實驗七 植物葉片中抗壞血酸(維生素C)含量的測定
實驗八 植物葉片中硫胺素(維生素B1)的測定
實驗九 植物葉片中核黃素(維生素B2)的測定
實驗十 植物葉片中維生素B6的測定
第二部分 植物的第二信使與部分元素
實驗十一 酶聯免疫法測定植物葉片中的脫落酸
實驗十二 植物葉片中脂肪酸成分的測定
實驗十三 植物葉片和根中一氧化氮含量的測定
實驗十四 植物葉片中鈣的測定(EDTA法)
實驗十五 植物葉片中硝態氮的測定
實驗十六 植物葉片中亞硝酸鹽的測定
實驗十七 植物葉片中磷的測定
實驗十八 原子吸收分光光度法測定植物葉片中鉀、鈉、鐵、銅、鎘、鈣、錳、鎂、鋅的含量
第三部分 植物的活性氧與抗氧化酶係統
實驗十九 植物葉片中丙二醛含量的測定
實驗二十 植物葉片中過氧化氫含量的測定
實驗二十一 植物葉片中超氧陰離子含量的測定
實驗二十二 植物葉片中榖胱甘肽含量的測定
實驗二十三 植物葉片中總蛋白的粗提與蛋白質含量的測定
實驗二十四 植物葉片中過氧化氫酶(CAT)活性的測定
實驗二十五 植物葉片中過氧化物酶(POD)活性的測定
實驗二十六 植物葉片中榖胱甘肽還原酶(GR)活性的測定
實驗二十七 植物葉片中抗壞血酸過氧化物酶(APX)活性的測定
實驗二十八 植物葉片中超氧化物歧化酶(SOD)活性的測定
實驗二十九 植物葉片中多酚氧化酶(PPCI)活性的測定
實驗三十 植物葉片中煙酰胺腺嘌呤二核苷酸氧化酶(NOX)活性的測定
第四部分 植物代謝的部分關鍵酶
實驗三十一 植物質膜H+-ATP酶活性的測定
實驗三十二 植物葉片中三磷酸甘油醛脫氫酶(GAPDH)活性的測定
實驗三十三 植物葉片中1,6-二磷酸醛縮酶活性的測定
實驗三十四 植物葉片中乙醇脫氫酶(ADH)活性的測定
第五部分 植物對病原細菌的抗性
實驗三十五 植物葉片對病原細菌的基礎抗性與係統獲得抗性的測定
實驗三十六 植物葉片中水楊酸(SA)含量的測定
主要參考文獻
名詞索引(中英文對照)
精彩書摘
《植物逆境生理學實驗指導》:
實驗十三 植物葉片和根中一氧化氮含量的測定
一、實驗原理
一氧化氮(nitric oxide,NO)在細胞內可以自由擴散,它不僅可以得電子,還可以失電子,因而既具有氧化性又具有還原性,可以和很多化學分子發生氧化還原反應。而對於一氧化氮的研究從20世紀70年代纔開始,1988年關於一氧化氮的研究獲得瞭諾貝爾生理學或醫學奬,此後一氧化氮的研究便引起瞭越來越多的關注。
在動物體內,一氧化氮主要是通過一氧化氮閤成酶(nitric oxide synthase,NOS)經過兩步氧化反應催化形成,而且已知動物細胞中的一氧化氮閤成酶是細胞色素P450相關的二聚體酶,一氧化氮閤成酶在提供還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸即還原型輔酶Ⅱ(NADPH)時能夠首先將L-精氨酸催化氧化形成N-羥基精氨酸,下一步再進行氧化形成瓜氨酸,並釋放齣一氧化氮,因而隻要提供相關的反應底物(L-精氨酸和NADPH等)和適宜的反應條件,一氧化氮閤成酶就可以催化形成一氧化氮。目前通過同位素標記等技術,在煙草、大豆、小麥等許多植物中均已經檢測到類似的植物一氧化氮閤成酶酶,已有的研究也錶明植體內中的一氧化氮閤成酶可以被各種生物脅迫和非生物脅迫的誘導.當加入N-硝基-L.精氨酸甲酯基精氨酸(NG-nitro-L-arginine methyl ester,L-NAME)等動物細胞一氧化氮閤成酶的酶活性抑製劑時,不僅可以抑製植物體內本來的一氧化氮閤成酶活性,而且可以抑製外來脅迫處理誘導的一氧化氮閤成酶酶活性的大量升高,進而可以抑製外來脅迫處理誘導的一氧化氮的大量産生。而在植物中,很多研究者都想分離齣植物體內的一氧化氮閤成酶基因,但都沒有取得突破性進展。
對於植物體內硝酸還原酶(nitrate reductase,NR)的研究比一氧化氮閤成酶的研究要順利得多,首先在擬南芥中分離鑒定瞭兩個硝酸還原酶(NR)基因,其中AtNR2占到瞭總硝酸還原酶活性的絕大部分而被認為是主要的硝酸還原酶。硝酸還原酶通常是把硝酸鹽還原成亞硝酸鹽,再將亞硝酸鹽還原産生一氧化氮。但在氣孔中通過對這兩個基因的單突變分析脫落酸誘導一氧化氮産生的量的比較錶明,AtNR1是氣孔中一氧化氮産生的主要來源。最近的一些研究通過硝酸還原酶(NR)nia1nia2雙突變體分析外源處理時一氧化氮的産生,說明AtNR參與瞭外源脫落酸、過氧化氫、生長素、細胞分裂素、熱脅迫、冷脅迫及激發子誘導的一氧化氮閤成,同時硝酸還原酶還參與瞭氣孔開關的調節、主根和側根的發育等一氧化氮參與調控的生理過程,說明在這些生理過程中,AtNR是植物體內誘導一氧化氮大量産生的一條重要來源。
……
前言/序言
植物逆境生理學是研究植物生命規律及其調控的科學,理論性較強,與農業生産密切相關,因而也是一門實驗性科學。本書包含植物的脅迫錶徵與滲透調節物、植物的第二信息與部分元素、植物的活性氧與抗氧化酶係統、植物代謝的部分關鍵酶和植物對病原細菌的抗性5個部分,共36個實驗,基本涵蓋瞭植物逆境生理學的所有實驗操作。本書是作者在十多年來科研和教學基礎上逐步補充和完善而成,簡明扼要、由錶及裏、深入淺齣地介紹瞭植物逆境生理學相關實驗體係;既強調基礎理論體係與實驗技術的結閤,又注重知識的係統性與先進性,語言的通俗性和科學性。
本書引用瞭大量國內外同行的結果,在此一並錶示感謝。由於編寫時間倉促,以及編者水平有限和研究方嚮的局限性,書中難免存在一些不足和紕漏,敬請專傢和讀者給予批評指正和諒解。
本書能夠成稿,要感謝海南大學農學院何朝族研究員和陳銀華教授的大力幫助和支持,感謝海南大學教育教學改革研究課題(No.hdjy1601)和海南大學高層次人纔引進的科研項目經費(經費編號:kyqd1531)的支持,還要感謝科學齣版社的叢楠編輯在文字、圖錶和格式上認真細緻的修改校正及熱情耐心的關心與幫助。
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