實驗室解決方案：基因敲除實驗指南（原著第2版）（導讀版） pdf epub mobi txt 电子书 下载 2025

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[德] 屈恩 著

圖書標籤:

• 基因敲除
• 基因編輯
• 實驗指南
• 生物技術
• 分子生物學
• 實驗室技術
• 科研方法
• 基因工程
• 小鼠模型
• CRISPR

出版社： 科学出版社

ISBN：9787030343109

版次：2

商品编码：11051622

包装：精装

开本：16开

出版时间：2012-05-01

页数：516

正文语种：中文

編輯推薦

　　 《實驗室解決方案：基因敲除實驗指南（原著第2版）（導讀版）》整閤瞭基因打靶和小鼠遺傳學領域研究的突齣貢獻以及延伸而來的眾多經驗教訓。本書沿襲瞭《分子生物學方法》係列叢書的成功模式，提供瞭完整、詳細、既適用於初學者又適用於資深專傢的實驗操作指南。新版不止強調瞭過去七年裏新的基因突變技術的發展，也囊括瞭經典基因打靶技術的基本方法。本書共25章分為四個部分，分彆介紹瞭胚胎乾細胞基因誘變、乾細胞操作、基因工程小鼠的製備和突變體錶型分析。

內容簡介

　　 小鼠和人類基因組測序完成後，哺乳動物基因的功能鑒定及其分子互作網絡的闡明成為生命科學研究的下一個主要任務，小鼠基因組為這些研究提供瞭方便且重要的模型。《實驗室解決方案：基因敲除實驗指南（原著第2版）（導讀版）》的多位撰稿人在基因打靶和小鼠遺傳學領域有著豐富的研究經驗，他們全麵介紹瞭分步驟的實驗方案。除瞭著重闡述近幾年發展起來的多種基因突變技術，還涉及胚胎乾細胞的基因修飾、乾細胞操作、基因工程小鼠的製備和突變型分析等。《實驗室解決方案：基因敲除實驗指南（原著第2版）（導讀版）》秉承Sprjnger《分子生物學方法》係列叢書的一貫風格，闡述明晰、便於使用，各章包括內容簡介，必備材料與試劑的清單，易於操作的實驗室方案、疑難問題的注意事項和易犯失誤的避免。本書第二版全麵更新、專業，由經驗豐富的研究者提供瞭切實可行的實驗方案，對本領域的初涉者和遺傳學領域的研究人員而言是一本極具價值的參考書。

內頁插圖

目錄

前言
撰稿人
1．突變小鼠綜述
第一部分：胚胎乾細胞中的基因修飾
2．利用同源重組進行基因打靶載體的構建
3．基因捕獲載體和誘變作用
4．在胚胎乾細胞中的染色體工程技術
5．通過寡核苷酸單鏈DNA在胚胎乾細胞的基因修飾
6．shRNA轉基因小鼠的製備
7．利用甲基磺酸乙酯對小鼠胚胎乾細胞的誘變

第二部分：乾細胞操作
8．小鼠胚胎乾細胞的基因打靶
9．小鼠胚胎乾細胞的操作
10．胚胎乾細胞流程的建立
11．雙基因敲除胚胎乾細胞的製備
12．體外小鼠胚胎乾細胞全能性差異分析
13．胚胎乾細胞剋隆及小鼠核移植

第三部分：小鼠遺傳工程
14．小鼠囊胚的分離，顯微注射及移植
15．嵌閤體的聚集：包括胚胎乾細胞，二倍體，四倍體胚胎
16．利用八細胞胚胎乾細胞顯微注射獲得全能胚胎乾細胞F0代小鼠
17．利用細菌人工染色體進行Cre重組錶達轉基因小鼠的製備
18．誘導小鼠
19．建立和應用Cre重組酶轉基因數據庫
20．在小鼠中進行轉座子誘變
21．慢病毒轉基因技術
22．精子冷凍保存和體外受精

第四部分：錶型分析
23．在轉基因小鼠的錶型中遺傳背景的影響
24．突變小鼠的病理錶型
25．首要係統錶型
索引

前言/序言

好的，這是一份為您準備的圖書簡介，內容專注於《實驗室解決方案：基因敲除實驗指南（原著第2版）（導讀版）》之外的科學主題，力求詳實且具有專業性。 --- 圖書簡介：《細胞信號傳導：調控網絡與疾病機製》 導言：生命活動的精細調控 生命體是一個由無數分子機器精密協調運作的復雜係統。在這些過程中，細胞信號傳導構成瞭生物信息傳遞的“高速公路”。它決定瞭細胞如何感知外界環境變化，如何對刺激作齣反應，並最終調控生長、分化、代謝乃至凋亡等關鍵生命活動。任何信號通路上的微小失調，都可能引發嚴重的生理或病理後果，例如癌癥、神經退行性疾病和自身免疫性疾病。 本書《細胞信號傳導：調控網絡與疾病機製》旨在提供一個全麵、深入且與時俱進的視角，剖析當前細胞信號研究的前沿進展，重點聚焦於信號通路的復雜性、交談（crosstalk）以及它們在維持穩態和引發疾病中的核心作用。本書內容摒棄瞭對基礎分子生物學工具的詳盡介紹，而是將核心篇幅聚焦於信號網絡本身的結構、動態學以及臨床轉化潛力。 第一部分：核心信號通路與分子機器 本部分係統梳理瞭被認為構成現代細胞通訊基石的幾大經典信號通路，但我們側重於探討其在動態環境下的調控細節而非基礎機製的描述。 1. 膜受體與G蛋白偶聯受體（GPCRs）的動態激活： 我們將深入探討GPCRs如何通過構象變化捕獲信號，並激活下遊的G蛋白異源三聚體。重點分析G蛋白亞基的特異性激活機製，以及受體後修飾（如磷酸化和泛素化）對信號振幅和持續性的實時調控。研究視角將側重於受體偏性激動劑（biased agonism）的分子基礎及其在藥物設計中的應用前景，而非單純的信號開啓步驟。 2. 酪氨酸激酶受體（RTKs）的網絡架構： RTKs是細胞生長和增殖信號的核心節點。本書詳細分析瞭PDGF、EGF、VEGF等關鍵受體傢族的配體結閤、二聚化與自磷酸化事件。區彆於基礎教材的靜態描述，我們著重探討瞭受體胞內結構域的“對接蛋白庫”——即各種SH2/PTB結構域蛋白如何根據磷酸化位點的精確組閤，選擇性地組裝信號復閤物，從而實現信號的分支（branching）。 3. 細胞因子與JAK/STAT通路的高級解析： JAK/STAT係統是免疫應答和造血過程的關鍵調控者。本章聚焦於信號的“放大效應”：單個細胞因子結閤如何通過JAK的循環催化激活多個STAT分子，以及STAT的核轉運、DNA結閤特異性與其轉錄調控目標基因的差異性。尤其關注STAT蛋白之間的異源二聚體形成及其對細胞命運決定的影響。 第二部分：信號網絡中的關鍵節點與調控機製 本部分將焦點從單一通路轉移到連接不同通路的復雜網絡結構，探討信號的整閤與決策機製。 4. MAP激酶級聯反應（MAPK Cascades）的振蕩與模式形成： MAPK通路（如ERK, JNK, p38）是細胞對環境壓力做齣反應的通用係統。我們不再簡單列舉三級激酶，而是深入分析其動力學特性——包括信號振蕩（oscillation）的生成機製（如負反饋迴路的引入）以及這些時間模式如何被細胞精確讀取，以指導不同的細胞命運（如暫時激活vs.永久激活）。 5. 磷脂信號分子（Phosphoinositides）的膜錨定與定位作用： 磷脂酰肌醇激酶（PI3K）及其下遊的AKT/PKB通路是生存和代謝的核心。本章重點闡述磷脂信號分子（如PIP3）如何在不同的細胞區室（膜、細胞質、核）精確生成和降解，以及它們如何作為“分子碼”來招募和定位特定信號蛋白，實現信號在膜錶麵的空間限製和時序控製。 6. 錶觀遺傳與信號傳導的深度耦閤： 信號通路並非孤立地作用於基因轉錄的“開關”，它們直接影響染色質的可及性。本部分詳細探討瞭信號分子（如激酶或特定的轉錄因子）如何直接修飾組蛋白修飾酶（如HATs或HDACs）或染色質重塑因子，從而實現信號對基因錶達的長期、記憶性調控。 第三部分：信號失調與疾病建模 本部分著眼於信號傳導的病理生理學意義，探討信號網絡的失控如何驅動重大疾病的發生與發展。 7. 腫瘤發生中的信號重塑與通路冗餘： 癌細胞的標誌性特徵之一是信號傳導的持續激活。本書分析瞭不同類型的基因突變（如受體過錶達、磷酸酶失活、GAP失活）如何導緻信號通路“卡死”在開啓狀態。重點討論細胞如何利用信號通路間的“冗餘性”和“補償機製”來繞過單一靶嚮治療的抑製，以及設計多靶點策略的必要性。 8. 神經退行性疾病中的信號失穩： 在阿爾茨海默病、帕金森病等神經退行性疾病中，信號傳導異常扮演瞭重要角色。我們關注內質網應激信號（UPR）、綫粒體信號以及tau蛋白過度磷酸化的信號級聯反應，探討這些失調的信號如何導緻神經元凋亡和功能喪失，以及靶嚮這些異常信號網絡的治療潛力。 9. 免疫逃逸與慢性炎癥中的信號錯位： 免疫細胞的激活與抑製依賴於復雜的信號平衡。本章分析瞭腫瘤微環境如何通過異常的細胞因子信號（如TGF-β, IL-10）來抑製免疫反應。同時，探討在類風濕性關節炎等自身免疫病中，Toll樣受體（TLRs）信號通路或共刺激分子信號的過度激活如何導緻長期的組織損傷。 結語：未來方嚮——時空精度與係統生物學整閤 本書的終極目標是引導讀者超越對單個分子功能的認知，進入到理解信號網絡作為一個整體的動態係統行為。未來的研究將需要更精細的成像技術和單細胞分析來解析信號在時間和空間上的精確編碼，並將其結果整閤到計算模型中，以期開發齣真正能夠“重編程”病理信號網絡的革命性療法。本書為緻力於信號轉導研究的學者和高階研究生提供瞭必要的高級理論框架和前沿視野。

评分☆☆☆☆☆

《實驗室解決方案：基因敲除實驗指南（原著第2版）（導讀版）》給我的感覺，就像是在實驗室裏的一位老朋友，它不會給你灌輸生硬的理論，而是用一種近乎交談的方式，與你分享多年的經驗和心得。這本書最大的亮點在於，它不僅僅是一本技術手冊，更是一本“思考指南”。它鼓勵讀者在理解實驗原理的基礎上，去思考實驗設計的邏輯，去預判可能齣現的睏難，並提供相應的解決方案。我個人特彆喜歡它在討論實驗倫理和數據解讀的部分，這些往往是被其他技術指南所忽略但卻至關重要的內容。作者用一種非常審慎和負責任的態度，引導讀者思考基因敲除技術在科學研究和社會應用中的深遠影響。這讓我感覺，這本書不僅僅是在教我如何操作，更是在培養我作為一個嚴謹的科學工作者的素養。它讓我意識到，科學研究的價值，不僅僅在於技術的掌握，更在於對科學倫理的尊重和對社會責任的擔當。

评分☆☆☆☆☆

坦白說，初次接觸《實驗室解決方案：基因敲除實驗指南（原著第2版）（導讀版）》時，我有些擔心它會過於晦澀難懂，畢竟基因敲除涉及的分子生物學知識非常深入。然而，這本書的“導讀版”定位果然名不虛傳，它在保持科學嚴謹性的同時，采用瞭非常易於理解的語言和邏輯結構。作者仿佛站在讀者的角度，將復雜的概念層層剝開，輔以清晰的圖示和流程圖，讓即使是背景知識相對薄弱的研究人員，也能迅速掌握核心要點。我尤其欣賞它對於不同基因敲除策略的比較分析，清晰地列齣瞭各自的優勢、劣勢以及適用範圍，這使得我在選擇最適閤自己研究的實驗方案時，能夠有據可循，避免走彎路。對於那些希望在基因編輯領域快速入門，但又缺乏足夠指導的研究者而言，這本書無疑是一本不可多得的“敲門磚”。它不僅教授瞭“做什麼”，更重要的是教會瞭“為什麼這麼做”，這種深入的理解，對於培養獨立科研能力至關重要。

评分☆☆☆☆☆

剛拿到這本《實驗室解決方案：基因敲除實驗指南（原著第2版）（導讀版）》，我激動的心情簡直無法平復！作為一名剛入門的生物醫學研究助理，基因敲除這個概念對我來說既熟悉又陌生，總是覺得像是隔著一層薄紗，窺探著一個神秘而強大的技術。這本書的名字就如同黑暗中的燈塔，指引著我前進的方嚮。翻開扉頁，厚實的紙張和精美的排版立刻給人一種專業且值得信賴的感覺。我對這本書的期待值實在是太高瞭，希望它能像一位經驗豐富的導師，循循善誘地將基因敲除的奧秘一一揭示。我尤其關注那些關於實驗設計、操作流程和數據分析的章節，因為我知道，一個成功的基因敲除實驗，細節決定成敗。我腦海中已經勾勒齣無數個在實驗室裏，對照著書本上的圖解，小心翼翼地進行每一步操作的畫麵。這本書不僅僅是一本教材，更像是我通往基因編輯世界的一把金鑰匙，我迫不及待地想要解鎖它的力量，並將其應用到我的研究課題中，期待能夠在這個領域有所突破。

评分☆☆☆☆☆

讀完《實驗室解決方案：基因敲除實驗指南（原著第2版）（導讀版）》的部分內容，我最大的感受就是它的“接地氣”！很多時候，我們在課堂上學到的知識，到瞭實際操作層麵總會遇到各種意想不到的睏難。這本書就像一位身經百戰的實驗者，將那些教科書上“輕描淡寫”的環節，例如試劑的準備、儀器的校準、甚至實驗過程中的一些“潛規則”，都用極其生動且富有條理的方式呈現齣來。我特彆喜歡它在介紹各種基因敲除技術時，不僅僅是羅列齣理論，更穿插瞭大量的案例分析和“避坑指南”。例如，關於CRISPR-Cas9技術，它不僅僅講解瞭原理，還詳細分析瞭不同sgRNA設計軟件的優缺點，以及如何針對特定的基因位點進行優化。這對於我這樣希望盡快上手並解決實際問題的研究人員來說，簡直是如獲至寶。我感覺自己不再是孤軍奮戰，而是有瞭一個經驗豐富的“戰友”在背後提供支持，讓我在麵對復雜的實驗挑戰時，能夠更加從容和自信。

评分☆☆☆☆☆

我一直對基因敲除技術在疾病治療和基礎研究中的潛力感到著迷，而《實驗室解決方案：基因敲除實驗指南（原著第2版）（導讀版）》這本書，則將這種著迷轉化為瞭實際行動的信心。這本書最讓我印象深刻的是它的“全流程”覆蓋，從最基礎的細胞培養和質粒構建，到復雜的基因遞送和陽性剋隆篩選，每一個環節都進行瞭詳盡的闡述。並且，它還針對不同的模型係統，例如哺乳動物細胞、模式生物等，提供瞭不同的實驗策略和注意事項。這讓我覺得，無論我未來的研究方嚮如何，這本書都能提供寶貴的指導。我尤其關注書中關於實驗結果的驗證和數據分析的部分，它清晰地講解瞭如何利用Western Blot、qPCR、測序等多種方法來確認基因敲除的效率和特異性，這對於確保實驗結果的可靠性至關重要。這本書就像一位經驗豐富的“嚮導”，帶領我在基因敲除的復雜世界裏，找到清晰的路徑，並自信地前行。

评分☆☆☆☆☆

如果能有第三版就好了.

评分☆☆☆☆☆

对10元以上商品发表大于500字心得的评价才可获得奖励。这个规则也太BT了吧，不想给评价积分就算啦，搞到买本书还要写一篇读后感才可以给评价积分。我容易吗我。不就是摆明要我剪切粘贴一大堆废话吗，多浪费网络空间啊。好吧，我要开始写评价了。独家的套装，比一本一本买要便宜很多。总得来说还是很不错的，纸张的质量也挺好的，就是每本书开始的前几页看不清楚，但正文很好，不知道原因。切割也有一点失误，有几页是连在一起的。还有就是说的那个充值的标识怎么书上没有找到？还是说网上买的就没有那个服务了？这些都是无所谓的小事了，只要内容看的清，是正确的就行了。毕竟买书就是买内容。特别是这种书，就是为了考试过关，又不是用来收藏的。万国的书的内容还是很不错的，希望这次可以过。还有一个建议，京东的打包员能不能仔细一点，包装的很好，就是书是个皱的，一压后说到我手里就是个皱皱的，虽然说压一下就可以了，但看到了还是不爽的，毕竟这也是一本新书，怎么皱的和旧书一样了。对10元以上商品发表大于500字心得的评价才可获得奖励。这个规则也太BT了吧，不想给评价积分就算啦，搞到买本书还要写一篇读后感才可以给评价积分。我容易吗我。不就是摆明要我剪切粘贴一大堆废话吗，多浪费网络空间啊。

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