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內容簡介

　　《實驗教學示範中心植物學科係列實驗教材：植物分子生物學技術實驗指導》以植物分子生物學技術為主綫，從植物分子生物學常用技術、植物DNA操作技術、植物RNA操作技術、植物蛋白質操作技術和生物信息學技術等5個方麵介紹32個實驗技術。植物分子生物學常用技術主要包括質粒DNA製備、DNA電泳、PCR擴增、Southern雜交、Northern雜交和Western雜交等技術；植物DNA操作技術主要包括植物DNA的提取、酶切片段分離、未知序列TAIL PCR擴增、基因錶達載體構建、轉基因植物快速鑒定、PCR點突變和農杆菌浸花法轉化等實驗技術；植物RNA操作技術主要包括植物總RNA提取、cDNA閤成、cDNA芯片分析、實時定量PCR、RNAi載體構建、miRNA剋隆與錶達、RACE技術等實驗技術；植物蛋白質操作技術主要包括植物蛋白質分離純化、雙嚮電泳技術、DNA結閤蛋白分離、ELISA分析、酵母雙雜交、蛋白質磷酸化修飾、蛋白質與核酸相互作用等實驗技術；生物信息學技術主要介紹生物信息學網站基礎知識、核酸序列分析和蛋白質序列分析等。
　　《實驗教學示範中心植物學科係列實驗教材：植物分子生物學技術實驗指導》可作為高等院校生命科學相關專業的植物分子生物學實驗課程教學用書，同時也可供相關專業研究生、教師與科研工作者開展植物分子生物學科學研究作參考用書。

目錄

第一篇 植物分子生物學常用技術
實驗一質粒DNA的製備
實驗二DNA酶切
實驗三DNA瓊脂糖凝膠電泳
實驗四目的基因的PCR擴增
實驗五Southern雜交
實驗六Northern雜交
實驗七Western雜交

第二篇 植物DNA操作技術
實驗八水稻基因組DNA的提取與檢測
實驗九DNA酶切片段的分離與迴收
實驗十擬南芥未知序列的TAIL??PCR擴增
實驗十一植物基因錶達載體的構建
實驗十二反嚮斑點雜交快速鑒定轉基因植物
實驗十三DNA的PCR定點突變
實驗十四農杆菌浸花法轉化擬南芥

第三篇 植物RNA操作技術
實驗十五植物總RNA的提取及快速檢測
實驗十六植物總RNA的cDNA閤成
實驗十七cDNA芯片技術分析擬南芥熱激因子錶達
實驗十八植物不同組織mRNA的實時定量PCR分析
實驗十九植物RNAi載體的構建及功能鑒定
實驗二十植物miRNA剋隆與錶達分析
實驗二十一RACE技術擴增植物全長cDNA

第四篇 植物蛋白質操作技術
實驗二十二植物蛋白質――超氧化物歧化酶的分離純化
實驗二十三植物蛋白質雙嚮電泳技術
實驗二十四DNA固定化分離植物DNA結閤蛋白
實驗二十五ELISA技術分析植物蛋白質的錶達
實驗二十六Western雜交檢測植物蛋白質的錶達
實驗二十七酵母雙雜交技術分析植物蛋白相互作用
實驗二十八植物蛋白質磷酸化修飾
實驗二十九植物蛋白質與核酸相互作用

第五篇 生物信息學技術
實驗三十生物信息學網站基礎知識
實驗三十一核酸序列分析
實驗三十二蛋白質序列分析
附錄
附錄一分子生物學常用試劑的配製
附錄二分子生物學實驗技術和生物信息學綜閤網址
參考文獻

前言/序言

　　分子生物學主要是從分子水平上闡述生命現象和本質的科學，是現代生命科學的“共同語言”。分子生物學又是生命科學中進展迅速的前沿學科，它的理論已經滲透到其他生命學科的各個領域，它的核心內容是通過生物的物質基礎——核酸、蛋白質等生物大分子的結構、功能及其相互作用的規律的研究來闡明生命分子基礎，從而探討生命的奧秘。
　　分子生物學也是一門實驗性學科，分子生物學技術已被廣泛應用於基礎生物學、醫學、農業科學、林業科學和生物産業等領域，並且發揮著重要的作用。由於分子生物學特彆是分子生物學技術的重要性，我國高等農林院校植物生産類、林學類以及生物科學類專業已廣泛開設瞭“分子生物學”和“分子生物學技術”等課程。然而，由於高等農林院校專業的特殊性，“分子生物學技術”課程的開設主要以植物分子生物學實驗技術為主。但是目前國內齣版的植物分子生物學技術實驗教材很少，且現已齣版的分子生物學實驗教材大多涉及實驗麵廣，內容較多，作為高等農林院校植物生産類、林學類以及生物科學類專業本科生實驗教材不太適閤。
　　基於上述情況，在化學工業齣版社的支持下，作為主編單位的湖南農業大學組織江西農業大學、四川農業大學和浙江農林大學等農林院校，邀請長期從事植物分子生物學教學和研究的教授、博士編寫瞭《植物分子生物學技術實驗指導》教材。本教材以植物分子生物學技術為主綫，按植物分子生物學常用技術、植物DNA操作技術、植物RNA操作技術、植物蛋白質操作技術和生物信息學技術等五個方麵編寫32個實驗教學內容。所選32個實驗可操作性強，實驗條件易滿足，編寫內容實用，基本涵蓋目前植物分子生物學通用技術，適閤高等農林院校植物分子生物學實驗教學的需要。本教材也可作為其他高等院校生命科學相關專業的植物分子生物學實驗課程教學用書，同時也可供相關專業研究生、教師與科研工作者開展植物分子生物學科學研究作參考用書。
　　本教材由饒力群教授負責編寫前言、實驗十二～十四和統稿工作，劉誌教授負責編寫實驗三十～三十二和附錄二，鬍頌平博士負責編寫實驗一、實驗二、實驗八和實驗九，吳琦博士負責編寫實驗三、實驗四、實驗十、實驗十一和實驗十五，汪啓明博士負責編寫實驗十六～二十一，楊華博士負責編寫實驗二十二～二十九，唐忠海博士和王正加博士負責編寫實驗五～七，唐忠海博士負責編寫附錄一。
　　鑒於時間及作者能力有限，書中不妥之處，敬請讀者批評指正，作者不勝感謝。
　　編者2013年4月
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