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內容簡介

　　《精編分子生物學實驗技術（研究生本科生教學用書）》共二十章：第一章到第十三章介紹分子生物學常用實驗技術；第十四章到第十七章著重闡述分子生物學相關的細胞、組織和動物實驗；第十八章為分子生物學常用數據庫；第十九章為計算機模擬小分子藥物設計；第二十章闡述瞭分子生物學實驗的設計和統計分析方法。
　　《精編分子生物學實驗技術（研究生本科生教學用書）》從初學者的角度齣發，符閤初學者的需要，也可為從事基礎醫學研究的人員提供幫助。

作者簡介

　　李燕，女，中國人民解放軍空軍軍醫大學（第四軍醫大學）生物化學與分子生物學教研室副教授。中國生物化學與分子生物學會會員，中國神經科學學會會員；獲評陝西省青年科技新星和原總後勤部優秀青年科技人纔扶持對象；享受陝西省三秦人纔津貼和軍隊優秀專業技術人纔崗位津貼。從事醫學本科生和研究生教學工作14年。主編專著3部，參編教材5部。近年來發錶SCI收錄科技論文27篇，發錶教學論文6篇，主持國傢自然科學基金3項，獲國傢專利授權2項。

目錄

第一章 PCR技術
第一節 RT-PCR
第二節 實時定量PCR

第二章 RNA乾擾技術
第三章 MicroRNA研究方法

第四章 長鏈非編碼RNA研究方法
第一節 長鏈非編碼RNA概述
第二節 RNA pull-down鑒定RNA-蛋白質相互結閤
第三節 RNA免疫共沉澱技術

第五章 CRISPR/Cas9基因編輯技術
第一節 SgRNA的設計及打靶效應分析
第二節 受精卵注射CRISPR/Cas9係統製備基因編輯動物

第六章 重組DNA技術
第一節 大腸杆菌感受態細胞的製備
第二節 質粒DNA的轉化
第三節 質粒提取
第四節 瓊脂糖凝膠電泳檢測DNA
第五節 凝膠迴收DNA
第六節 重組DNA的構建
第七節 病毒載體介導的重組DNA技術
復製缺陷型腺病毒載體的包裝
慢病毒載體的包裝
第八節 目的蛋白的原核錶達與分離純化
目的蛋白的原核誘導錶達
目的蛋白的錶達檢測
菌體的細胞破碎
鎳離子親和層析純化
DEAE陰離子交換層析
凝膠過濾層析

第七章 Western-blot技術
第一節 蛋白樣品製備
第二節 蛋白定量
第三節 SDS-PAGE電泳
第四節 電轉移
第五節 酶免疫定位

第八章 蛋白相互作用篩選及驗證
第一節 酵母雙雜交係統篩選
第二節 免疫共沉澱
第三節 Pull-down實驗

第九章 蛋白泛素化檢測

第十章 轉錄調控機製研究
第一節 轉錄因子與靶基因相關性分析
第二節 靶基因的啓動子剋隆
第三節 報告基因活性分析
第四節 DNA-轉錄因子結閤分析
第五節 ChIP-Seq技術

第十一章 核酸甲基化分析
第一節 基因組DNA提取
第二節 DNA甲基化分析
第三節 RNA甲基化分析

第十二章 基因錶達譜芯片分析

第十三章 蛋白質譜分析

第十四章 細胞代謝研究方法
第一節 基於Seahorse生物能量分析儀測定糖酵解和綫粒體有氧代謝的方法
第二節 綫粒體呼吸鏈復閤體功能的測定

第十五章 相關細胞學技術
第一節 細胞凍存
第二節 細胞復蘇
第三節 細胞計數法測定生長麯綫
第四節 MTT法測定細胞增殖
第五節 CCK-8法測定細胞增殖
第六節 BrdU法測定細胞增殖
第七節 平闆剋隆形成實驗
第八節 軟瓊脂剋隆形成實驗
第九節 Transwell
第十節 劃痕實驗
第十一節 細胞周期的測定
第十二節 細胞凋亡檢測
第十三節 脂質體介導的質粒轉染
第十四節 病毒感染

第十六章 相關組織學技術
第一節 動物組織取材和固定
第二節 臨床標本收集方法
第三節 免疫組織（細胞）化學
第四節 間接免疫熒光
第五節 原位雜交技術

第十七章 相關常用動物實驗
第一節 裸鼠移植瘤動物模型
第二節 小動物活體成像技術

第十八章 分子生物學常用數據庫
第一節 基因基本信息的獲取
第二節 基因錶達調控分析
第三節 基因功能分析

第十九章 計算機模擬輔助小分子藥物設計
第一節 基於藥效團模型的虛擬篩選方法
第二節 基於分子對接的虛擬篩選
第三節 骨架遷越

第二十章 常用實驗設計和統計方法
第一節 完全隨機設計分組
第二節 樣本量估計軟件實現
第三節 實驗原始數據記錄及預處理
第四節 統計分析方法的選擇
第五節 學術論文設計方法描述
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